[发明专利]一种高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 201810757957.9 | 申请日： | 2018-07-11 |
| 公开（公告）号： | CN108977418A | 公开（公告）日： | 2018-12-11 |
| 发明（设计）人： | 杜昱光;程功;焦思明;张毓宸;冯翠;任立世;李建军;未金花 | 申请（专利权）人： | 中国科学院过程工程研究所 |
| 主分类号： | C12N9/18 | 分类号： | C12N9/18;C12N15/55;C12N15/81;C12P19/26 |
| 代理公司： | 北京方安思达知识产权代理有限公司 11472 | 代理人： | 陈琳琳;张红生 |
| 地址： | 100190 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 壳寡糖 脱乙酰酶 高效固氮 根瘤菌 制备方法和应用 毕赤酵母表达系统 毕赤酵母密码子 编码基因序列 氨基酸序列 全基因合成 编码基因 分泌表达 工业应用 核酸序列 生物活性 偏爱性 脱乙酰 乙酰基 调控 对壳 寡糖 脱除 还原 优化 | ||
1.一种高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶，其特征在于：所述高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶基因，其特征在于：编码权利要求1所述的高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶。
3.根据权利要求2所述的高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶基因，其特征在于：该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.包含权利要求2或3所述高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶基因的重组表达载体。
5.根据权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于：所述表达载体为pGBG1，表达载体pGBG1通过如下方式获得：
将表达载体pPIC9中的如SEQ ID NO.4所示信号肽序列进行密码子优化，获得适合在毕赤酵母中表达的如SEQ ID NO.5所示信号肽序列；
利用Nsi I/Xho I双酶切，将表达载体pPIC9中如SEQ ID NO.4所示的信号肽序列替换为如SEQ ID NO.5所示的信号肽序列，得到表达载体pGBG1。
6.一种权利要求1所述的高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：将权利要求4或5所述的重组表达载体导入毕赤酵母细胞，诱导并获得分泌表达的高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述毕赤酵母细胞为GS115。
8.权利要求1所述的高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶在几丁寡糖或壳寡糖脱乙酰中的应用。
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