[发明专利]一种以果葡糖浆作为碳源发酵生产普鲁兰多糖的方法在审
| 申请号： | 201810757976.1 | 申请日： | 2018-07-11 |
| 公开（公告）号： | CN108893505A | 公开（公告）日： | 2018-11-27 |
| 发明（设计）人： | 张卫;高谦;宋拴明;李光明;盖丽丰 | 申请（专利权）人： | 天津慧智百川生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12P19/10 | 分类号： | C12P19/10;C12N1/14;C12R1/645 |
| 代理公司： | 天津市尚文知识产权代理有限公司 12222 | 代理人： | 张东浩 |
| 地址： | 300457 天津市滨海新*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 普鲁兰多糖 果葡糖浆 碳源发酵 无水乙醇 离心去除菌体 发酵培养基 生化培养箱 种子培养基 种子液接种 发酵培养 斜面菌种 蔗糖 粗产品 发酵液 种子液 烘干 活化 预冷 冲洗 生产成本 沉淀 发酵 过滤 替换 配方 保存 生产 | ||
1.一种以果葡糖浆作为碳源发酵生产普鲁兰多糖的方法，其特征是，包括以下步骤：
菌种活化：将保存的斜面种子于28℃生化培养箱中培养2-3小时，制备活化后的斜面菌种；
（2）种子液的制备：将步骤（1）中活化后的斜面种子接种于种子培养基中，于28℃，180rpm摇床中培养30小时得到种子液；
（3）发酵罐发酵培养：按照发酵培养基体积计算，将步骤（2）中制备的种子液以2%-3％的接种量接种于装有发酵培养基的发酵罐中，转速350-450r/min，通风量为5 Nm3/h ，罐压恒定在0.02MPa ，28℃发酵培养80-88h；
（4）提取：发酵结束后，将发酵液离心去除菌体和其他沉淀物，加入2倍体积的无水乙醇，充分搅拌，4℃静置24小时使普鲁兰多糖充分沉淀，过滤后用无水乙醇再次冲洗，烘干即得到普鲁兰多糖粗产品。
2.根据权利要求1所述的一种以果葡糖浆作为碳源发酵生产普鲁兰多糖的方法，其特征在于，所述斜面培养基为PDA培养基，按质量分数计，培养基组成为新鲜马铃薯20%，葡萄糖2%，琼脂2%，余量为水。
3.根据权利要求1所述的一种以果葡糖浆作为碳源发酵生产普鲁兰多糖的方法，其特征在于，所述种子培养基组成为蔗糖90 g/L、(NH4)2SO4 1.2 g/L、MgSO4·7H2O 0.3 g/L、FeSO4·7H2O 0.04 g/L、K2HPO4·3H2O 2.5 g/L、NaCl 3.0 g/L、酵母浸粉 4.0 g/L，余量为水。
4.根据权利要求3所述的一种以果葡糖浆作为碳源发酵生产普鲁兰多糖的方法，其特征在于，所述种子培养基的pH调至6.2，121℃灭菌 20 min后使用。
5.根据权利要求1所述的一种以果葡糖浆作为碳源发酵生产普鲁兰多糖的方法，其特征在于，所述发酵培养基组成为果葡糖浆160-200g/L、MgSO4·7H2O 0.5 g/L、FeSO4·7H2O0.04 g/L、K2HPO4·3H2O 8 g/L、NaCl 3.5 g/L、蛋白胨 6.0 g/L，余量为水。
6.根据权利要求5所述的一种以果葡糖浆作为碳源发酵生产普鲁兰多糖的方法，其特征在于，所述发酵培养基的pH调至6.2，121 ℃灭菌 20 min后使用。
7.根据权利要求5所述的一种以果葡糖浆作为碳源发酵生产普鲁兰多糖的方法，其特征在于，所述果葡糖浆为F55型的果葡糖浆。
8.根据权利要求1所述的一种以果葡糖浆作为碳源发酵生产普鲁兰多糖的方法，其特征在于，提取时加入2倍体积的乙醇应为预冷的无水乙醇。
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