[发明专利]一种茶树鲜叶茸毛的提取方法及其应用在审
| 申请号： | 201810765261.0 | 申请日： | 2018-07-12 |
| 公开（公告）号： | CN108913648A | 公开（公告）日： | 2018-11-30 |
| 发明（设计）人： | 岳川;曹红利;孙云;林宏政;叶乃兴 | 申请（专利权）人： | 福建农林大学 |
| 主分类号： | C12N5/04 | 分类号： | C12N5/04;C12N15/10 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊;林文弘 |
| 地址： | 350002 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 茸毛 离心管 茶树鲜叶 液氮冷冻 放入 附着 管壁 分子生物学研究 代谢物分析 旋涡混合器 方法提取 快速冷冻 快速提取 连续振动 样品表面 茶树芽 茶树 手握 药匙 液氮 叶片 冷冻 应用 摩擦 保存 新鲜 重复 研究 | ||
【权利要求书】：
1.一种茶树鲜叶茸毛的提取方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
（1）取单芽、一芽一叶、一芽二叶和一芽三叶的茶树鲜叶，取下含茸毛的叶片和芽组织，自然舒展装入50ml离心管中，样品体积不超过离心管体积的2/3，拧紧离心管盖子，放入液氮中快速冷冻50s~150s；
（2）迅速从液氮中取出步骤（1）的装样品的离心管，用手握住置于旋涡混合器上连续振动20s~30s，通过振动作用将茸毛抖动脱落，脱落后的茸毛将黏于管壁和管底上；
（3）另取一个离心管放入液氮中冷冻，快速拧开步骤（2）的离心管盖子，用液氮冷冻过的药匙迅速刮下黏在管壁上的茸毛，将茸毛转入液氮冷冻着的离心管中，倒掉提取过的样品，再用药匙将管底的茸毛取出，迅速放入装茸毛的冷冻离心管中；
（4）将提取到的茸毛样品放入-80℃超低温冰箱保存。
2.根据权利要求1所述的一种茶树鲜叶茸毛的提取方法，其特征在于，步骤（2）中旋涡混合器的振动频率在1200~2800 r/min。
3.如权利要求1所述的提取方法提取到的茶树茸毛的应用，其特征在于，所述茶树茸毛在提取茶树茸毛总RNA中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，具体操作如下：将提取的茸毛样品置于液氮中研磨成粉末，取出100mg粉末，用离心柱型植物总RNA提取试剂盒提取茸毛中的总RNA。
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