[发明专利]一种美容针剂及其制备方法

权利要求书

1.一种美容针剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、在22-30℃、400×g条件下离心分离外周血样本，离心时间为15min，分别收集血浆层和浓缩血细胞层；

S2、在22-30℃、1500×g条件下离心分离步骤S1收集的血浆层，离心时间为15min，分别收集上层血清和血小板沉淀；然后用血清重悬血小板沉淀，得浓缩血小板；

S3、用生理盐水稀释步骤S1收集的浓缩血细胞层至两倍体积，得稀释液；然后将稀释液加到Ficoll分离液的上面，接着进行在700×g条件下离心分离，离心时间为20min，收集白膜层并洗涤，收集得到外周血单个核细胞；

S4、用培养基对步骤S3收集的外周血单个核细胞进行培养，培养瓶的细胞密度为1×10⁶-2×10⁶/mL，离心收集细胞沉淀，然后用0.9％氯化钠注射液重悬细胞沉淀并加入生理盐水进行离心洗涤，用自体血浆重悬洗涤后的细胞沉淀，得到自体活细胞；所述培养基由DMEM/F12培养基、B-27B-27无血清添加剂和BFGF组成，每500mLDMEM/F12培养基加入10mLB-27B-27无血清添加剂和3ul BFGF；所述DMEM/F12培养基中DMEM与F12的体积比为1:1；

将步骤S2所得的浓缩血小板和步骤S4所得的自体活性细胞混合，得到美容针剂；所述自体活性细胞和浓缩血小板均从同一自体外周血中分离而得。

2.根据权利要求1所述的美容针剂的制备方法，其特征在于，步骤S1中，外周血样本的量为30mL时，步骤S2中，所述用血清重悬血小板沉淀时，血清的用量为1-3mL。

3.根据权利要求1所述的美容针剂的制备方法，其特征在于，步骤S4中，用5mL自体血浆重悬洗涤后的细胞沉淀，得到自体活细胞。