[发明专利]EPO对间充质干细胞释放的外泌体的影响有效
申请号: | 201810769767.9 | 申请日: | 2018-07-13 |
公开(公告)号: | CN108841787B | 公开(公告)日: | 2022-08-19 |
发明(设计)人: | 李璇 | 申请(专利权)人: | 上海揽微赛尔生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 嘉兴倍创专利代理事务所(普通合伙) 33395 | 代理人: | 吉兴祥 |
地址: | 201600 上海市松江区*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | epo 间充质 干细胞 释放 外泌体 影响 | ||
1.一种提高间充质干细胞分泌的外泌体的数量或性能的方法,所述方法包括如下步骤:(1)将MSC悬浮于MSC无血清培养基中,接种于培养皿,培养过夜使细胞贴壁;(2)去除培养基,换用α-MEM培养基,并加入红细胞生成素(EPO),继续培养72h;(3)收集上清,离心去除细胞碎片,经滤膜过滤,离心收集沉淀,将沉淀悬浮于缓冲液中,即获得数量和性能提高的外泌体,所述性能是指外泌体的促内皮细胞增殖能力和促血管新生能力,其中步骤(2)中EPO的浓度为1U/ml,步骤(3)中去除细胞碎片的离心条件为1500g,30min,滤膜过滤后的离心条件为100,000g,离心1h,步骤(3)中将沉淀悬浮于含5mmol/L KCl,1mmol/L MgCl2和136mmol/L NaCl的缓冲液中;所述间充质干细胞是人脐带MSC。
2.如权利要求1所述的方法,其中步骤(1)中按照5×106细胞/皿接种于培养皿。
3.红细胞生成素(EPO)在提高间充质干细胞分泌的外泌体的数量或性能方面的应用,其中所述性能是指外泌体的促内皮细胞增殖能力和促血管新生能力,其特征在于,应用红细胞生成素(EPO)提高间充质干细胞分泌的外泌体的数量或性能时采用权利要求1所述的步骤,所述间充质干细胞是人脐带MSC。
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