[发明专利]谷氨酸棒杆菌突变株及其在L-亮氨酸生产中的应用

权利要求书

1.谷氨酸棒杆菌突变株，保藏编号为CGMCC No.15720。

2.根据权利要求1所述的谷氨酸棒杆菌突变株，其特征在于，其遗传标记为谷氨酸缺陷、甲硫氨酸缺陷、异亮氨酸缺陷、2-噻唑丙氨酸抗性、磺胺胍和β-羟基亮氨酸抗性。

3.L-亮氨酸的生产方法，是微生物发酵的生产方法，其特征在于，包括使用权利要求1所述的谷氨酸棒杆菌突变株进行微生物发酵的步骤。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)制备摇瓶种子液：将谷氨酸棒杆菌突变株接入摇瓶种子培养基中，30℃、100rpm振荡培养至OD₆₀₀＝10～15，得到摇瓶种子液；

摇瓶种子培养基：葡萄糖30g/L，玉米浆40mL/L，硫酸铵25g/L，尿素2g/L，KH₂PO₄·3H₂O1g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5g/L，FeSO₄·7H₂O 0.01g/L，MnSO₄·H₂O 0.01g/L，生物素100μg/L，维生素B₁ 300μg/L，pH7.0～7.2；

(2)发酵罐培养：将摇瓶种子液按8～10％(V/V)比例接入发酵罐发酵培养基中培养40～50h；发酵温度30～32℃，溶氧5～15％，pH 6.7～7.2，残糖降至40g/L以下时流加800g/L葡萄糖；

发酵罐发酵培养基：葡萄糖130g/L，硫酸铵5g/L，玉米浆10mL/L，KH₂PO₄ 5g/L，MgSO₄·7H₂O 2.5g/L，FeSO₄·7H₂O 0.01g/L，MnSO₄·H₂O 0.01g/L，生物素100μg/L，维生素B₁ 300μg/L，L-蛋氨酸0.1g/L，L-异亮氨酸0.1g/L，L-谷氨酸0.1g/L，泡敌0.05g/L，pH7.0～7.2。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，还包括对发酵液的后处理，包括下述步骤：过滤除菌、除杂、脱色、除盐以及调pH至等电点后闪蒸浓缩、过滤、烘干。