[发明专利]高灵敏H2S电致化学发光传感器的制备方法及其应用

权利要求书

1.高灵敏H₂S电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于：其包括如下步骤：

（1）将富含C碱基的引物序列与银离子溶液混合，使引物序列形成C-Ag-C发卡结构；

（2）将经步骤（1）处理制得的C-Ag-C发卡结构引物序列通过Au-S键自组装到金电极表面；

（3）采用巯基己醇溶液对步骤（2）自组装后的金电极表面空白位点进行封闭处理，制得高灵敏H₂S电致化学发光传感器。

2.根据权利要求1所述的高灵敏H₂S电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于：步骤（1）的引物序列与银离子溶液按1∶8的体积比混合，并在95℃温度下退火处理。

3. 根据权利要求1所述的高灵敏H₂S电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于：步骤（2）中，将10 μL经步骤（1）处理制得的C-Ag-C发卡结构引物序列滴加到金电极表面，通过Au-S键与金电极进行自组装。

4.根据权利要求3所述的高灵敏H₂S电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于：步骤（2）中的金电极直径为2mm。

5. 根据权利要求4所述的高灵敏H₂S电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于：所述的金电极经过在麂皮上依次使用粒径为1.0 μm、0.3 μm、0.05 μm的Al₂O₃粉末进行抛光打磨，并依次使用乙醇、食人鱼洗液和蒸馏水超声清洗。

6. 根据权利要求3所述的高灵敏H₂S电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于：步骤（3）中，采用浓度为1 mM的巯基己醇溶液对步骤（2）自组装后的金电极表面空白位点进行封闭处理。

7.根据权利要求1所述的高灵敏H₂S电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于：步骤（2）和步骤（3）处理结束后，均需使用pH为7.4的MOPS缓冲液对金电极进行冲洗。

8.应用权利要求1至7之一制备方法制得的高灵敏H₂S电致化学发光传感器对H₂S定量检测的方法，其特征在于：其包括如下步骤：

（1）将高灵敏H₂S电致化学发光传感器置于一容器中，然后加入含H₂S的待检测样品，然后通过顶空富集的方法，使H₂S从待检测样品中挥发出并富集于金电极上；

（2）将富集有H₂S的金电极浸泡于H1和H2的引物探针中，使其引发HCR扩增反应，令金电极表面产生大量双链DNA结构；

（3）将经过步骤（2）处理的金电极浸泡在Ru(phen)₃²⁺溶液中，使Ru(phen)₃²⁺能够嵌入双链结构中以产生电致化学发光信号；

（4）使用电化学方法进行电化学响应信号的检测，根据电化学响应信号的强度对标准溶液或经步骤（3）处理后的溶液进行定量测定，实现对待检测的H₂S定量检测。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述的电化学方法为循环伏安法。

10. 根据权利要求9所述的方法，其特征在于：所述循环伏安法的工作参数为：以0.1V/s的扫描速率，Ag/AgCl为参比电极，铂丝为对电极，在0.2~1.0 V的电位范围内，根据电致化学发光信号的强度对H₂S浓度进行定量分析检测。