[发明专利]GMFB抗体作为制备糖尿病视网膜病治疗药物的应用

说明书

本发明涉及本发明涉及GMFB抗体的应用，尤其是涉及GMFB抗体作为制备糖尿病视网膜病变治疗药物的应用。本发明利用玻璃体腔注射技术为STZ诱导DM大鼠右眼注射GMFB抗体，左眼注射等量PBS，两周后使用ERG法检测大鼠双眼视觉功能的差异，发现注射GMFB抗体的眼球与未注射GMFB抗体的眼球相比，视功能有明显的改善。然后发现，在注射GMFB抗体的眼球视网膜中，GFAP的表达明显下调，且检测细胞凋亡的TUNEL染色也有所减弱，这说明玻璃体腔内注射GMFB抗体可作为DR早期干预的靶向，从而保护视功能。

技术领域

本发明涉及抗体GMFB的用途，尤其是涉及GMFB抗体作为制备糖尿病视网膜病治疗药物的应用。

背景技术

随着我国经济的高速发展和老龄化进程的加速，糖尿病(diabetes milletus，DM)的患病率正呈快速上升的趋势，成为继心脑血管疾病和肿瘤之后另一个严重危害人民健康的重要慢性非传染性疾病。世界卫生组织推测，在2025年中国糖尿病患者将达到3亿。糖尿病视网膜病变(Diabetic Retinopathy,DR)，简称糖网病，是糖尿病最常见的并发症，在DM患者中1/3发生DR，1/10发生致命性威胁视力的糖尿病黄斑水肿(diabetic macularedema,DME)或者增殖性糖网病(proliferative diabetic retinopathy,PDR)，严重影响患者生活质量，世界范围内DR已经成为显著的社会负担和社会问题。

DR曾被认为是视网膜的微血管病变，微循环损害是DR的经典标志，但是越来越多的证据提示在DR的病理过程中神经变性是一个早期事件，并参与微血管异常的发展。组织学上神经元凋亡和反应性的胶质化是DR神经变性的最重要的特征。目前DM捐献眼在眼科检查没有发现任何微循环异常，但是已经具有主要的神经变性的特点。视网膜节细胞(RGC)是DR最先被检测的发生凋亡的细胞；RGC丢失导致神经纤维层变薄，在DM患者或者有轻微DR的DM患者通过OCT检测都检测到，在没有任何微血管病变的DM I型和II型病人发现ERG(electroretinogram，视网膜电流图)异常。神经元凋亡伴随着Muller胶质细胞的变化。目前尚不清楚神经元凋亡和胶质化哪一个在DR中是第一个发生的事件。研究DR神经变性的机制及鉴定在神经变性的介导者对于研发新的治疗策略是非常必要的。从临床角度早期鉴别神经变性对于基于神经保护的药物的应用是必须的。

DR神经变性的机制研究现状：介导DR神经变性的主要机制有细胞外兴奋毒性谷氨酸(Glutamate，Glu)集聚、氧化应激增加、视网膜分泌保护因子的减少及慢性炎症。Schellin SA等用光镜和电镜检测发现，DM早期Muller细胞核已发生改变，而视网膜血管内皮细胞、周细胞并未见明显病理改变，DM早期视网膜Muller细胞的超微结构和生理功能已发生变化，不仅影响早期DM患者神经细胞功能异常(表现为视觉敏感度及色觉敏感度下降，视网膜振荡电位b波异常)，而且影响整个DR的进展过程。在研究介导DR神经变性的分子中，我们更关注Muller细胞产生的分子。

胶质细胞成熟因子beta(glia maturation factor beta,GMFB)是一个小分子蛋白质，最早从牛脑分离纯化的17kd酸性胞浆蛋白，进化上高度保守，在中枢神经系统主要由星形胶质细胞产生，对脑组织生长、分化和再生有重要的作用，其表达在发育期上调，成年明显降低。在大鼠视网膜GMFB仅在Muller细胞表达，从胚胎14天到成年均表达。新近研究显示GMFB是一种促炎因子，与人中枢神经系统退行性疾病密切相关，如阿茨海默病和帕金森病。GMFB基因敲除小鼠能够抵抗实验性自身免疫性脑炎和MPTP的毒性。

目前用于DR进展相关的细胞因子包括以下4类：(1)与调节自然免疫有关的因子，如IL-1b和IL-10；(2)调节淋巴细胞激活增殖和分化的因子，如IL-6和IL-12；(3)与激活巨噬细胞相关的因子，如TNFa和TGFb；(4)趋化因子，如MCP-1和SDF-1等。