[发明专利]香豆素并木脂素及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一类香豆素并木脂素及其制备方法和用途。所述的香豆素并木脂素具体为6个从山乌桕(Sapium discolor(Champ.ex Benth.)Muell.Arg.)中分离得到的化合物。申请人的试验表明，本发明所述化合物在不影响BV2小胶质细胞存活率的情况下，能够显著抑制LPS刺激的BV2小胶质细胞NO释放，其中化合物2a的抑制作用稍强于临床常用药米诺环素，具有较好的潜在药用价值，有望用于神经退行性病症药物的制备。

技术领域

本发明涉及从植物中提取分离的活性成分，具体涉及从山乌桕中提取分离的香豆素并木脂素及其制备方法和用途。

背景技术

神经退行性疾病是影响人类健康的一类疾病的总称，它是一组以神经元退行性病变为特征的慢性、进行性神经系统疾病。每种神经退行性疾病都有其特定的诱发原因，虽然诱发这些疾病的病因不尽相同，但是神经炎症的出现是此类疾病的共同特征。

在参与神经炎症介导的神经退行性病变的几种细胞中，小胶质细胞是最重要的一种。小胶质细胞是中枢神经系统中的常驻免疫细胞。正常情况下，静息的小胶质细胞起免疫监视作用，维持神经系统的正常功能。在病理条件下，小胶质细胞可被激活，它的适度激活将在一定程度上保护神经元，但其过度活化则会产生慢性炎症反应，释放多种炎症因子和细胞毒因子。这些炎症因子的持续大量释放，会直接损伤神经元，并进一步激活小胶质细胞的过度活化形成恶性循环，最终导致神经元逐渐退行性改变或死亡而发生神经退行性疾病。基于神经退行性疾病发病的神经炎症理论，目前对于减轻患者脑内炎症反应、延缓病情发展的药物主要集中在非甾体抗炎药(NSAIDs)和四环素类抗生素等，但其临床疗效并不乐观。

传统的天然药物具有使用历史悠久、毒副作用相对较小的优点，从中寻找安全性高、结构新颖的神经炎症抑制剂，成为近年来神经退行性疾病药物研发的新着眼点。山乌桕(Sapium discolor(Champ.ex Benth.)Muell.Arg.)又名红乌桕，为大戟科乌桕属植物，分布于我国广西、广东、云南、贵州、江西、浙江、福建及台湾诸省，民间将其作为一种药用植物，取其叶茎根入药，主治毒蛇咬伤、痈肿、皮肤湿痒等症。目前尚未见有从山乌桕中提取香豆素并木脂素及其抗神经炎症活性的相关报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一类结构新颖的香豆素并木脂素及其制备方法，以及它们的应用。

本发明所述的香豆素并木脂素为具有下述式1a-3a和1b-3b所示结构的香豆素并木脂素及其药效学上可接受的盐：

本发明还提供上述香豆素并木脂素的制备方法，它们来源于山乌桕茎和/或叶。具体的制备方法包括以下步骤：

1)获取山乌桕茎和/或叶的醇提物；

2)将醇提物加水混悬，依次用石油醚和乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯萃取部位，浓缩，得到乙酸乙酯萃取物；

3)将乙酸乙酯萃取物上硅胶柱层析，依次用第一洗脱剂和第二洗脱剂洗脱，利用薄层层析检识合并流份，分别得到A-G共7个流份；其中，第一洗脱剂为由石油醚和丙酮，或者是由石油醚和乙酸乙酯按100：1-1：1的体积比组成的混合溶剂；第二洗脱剂为由二氯甲烷和甲醇，或者是由氯仿和甲醇按100：1-1：1的体积比组成的混合溶剂；

4)将E流份上MCI柱层析，用第三洗脱剂洗脱，利用薄层层析检识合并流份，分别得到E1-E11共11个流份；所述第三洗脱剂为由甲醇和水按10:90-100:0的体积比组成的混合溶剂；

5)将E7流份上C18反相色谱柱层析，用第四洗脱剂洗脱，利用薄层层析检识合并流份，分别得到E7a-E7i共9个流份；所述第四洗脱剂为由甲醇和水按10:90-100:0的体积比组成的混合溶剂；