[发明专利]一种棉花紫化突变体HS2的特异性鉴定引物及其应用有效
申请号: | 201810778999.0 | 申请日: | 2018-07-16 |
公开(公告)号: | CN109234427B | 公开(公告)日: | 2021-10-26 |
发明(设计)人: | 孙玉强;柯丽萍 | 申请(专利权)人: | 浙江理工大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
地址: | 310018 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 棉花 突变体 hs2 特异性 鉴定 引物 及其 应用 | ||
1.一种棉花紫化突变体HS2的特异性鉴定引物,其特征在于所述特异性鉴定引物为HS2A和HS2APF、HS2B和HS2BPR两对引物中的一对或两对;
HS2APF:GTCCGCAATGTGTTATTAAG;
HS2A:AGTCATTTGCAGTACCACCT;
HS2B:TCATCATTTTGGCTCCGTAA;
HS2BPR:TTGACAGGATATATTGGCGG。
2.一种权利要求1所述棉花紫化突变HS2的特异性鉴定引物在棉花紫化性状PCR检测和筛选中的应用。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述PCR检测以待测棉花的基因组DNA为模板,分别以HS2APF和HS2A、HS2B和HS2BPR中的一对或两对为引物进行PCR扩增,若HS2APF和HS2A引物对的PCR扩增产物大小为520bp,和/或 HS2B和HS2BPR引物对的PCR扩增产物大小为560bp,则待测棉花来源于紫化突变体HS2。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述PCR扩增体系为:50ng/μL模板DNA 1微升、10mM dNTP 0.5微升、20μM上游引物0.25微升、20μM下游引物0.25微升、10×缓冲液2微升、Taq酶1U,总反应体积20微升。
5.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述PCR扩增条件为:95℃,3分钟;94℃,30秒,58℃,30秒,72℃,30秒,35个循环;72℃延伸5分钟。
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