[发明专利]样品制备方法

权利要求书

1.一种测序文库核酸，其包含：

第一核酸链，所述第一核酸链包含：

5’序列，所述5’序列包含源自与核酸样品序列退火的第一随机引物群的第一引物，

3’序列，所述3’序列包含所述核酸样品序列的片段，其中所述片段包含至少200bp，

3’末端，所述3’末端不能支持链延伸；和

至少一个生物素亲和标签，所述非核酸亲和标签在所述第一核酸链的3’末端位置结合；

第二核酸链，所述第二核酸链包含源自与所述第一核酸链退火的第二随机引物群的第二引物，

其中所述第二核酸链的3’末端与所述第一核酸链退火，进而经配置以引发与所述第一核酸链互补的合成。

2.根据权利要求1所述的测序文库核酸，其中所述第一核酸链由在所述3’末端位置引入生物素标记的ddNTP终止。

3.根据权利要求1所述的测序文库核酸，其中所述生物素亲和标签包含在所述第一核酸链的3’末端与双脱氧部分结合的生物素，且其中所述生物素与链霉亲和素部分结合。

4.根据权利要求1所述的测序文库核酸，其中所述第二引物包含衔接子序列区域。

5.根据权利要求1所述的测序文库核酸，其中所述第二核酸链经由DNA聚合酶延伸以形成所述第一核酸链5’末端的互补体。

6.根据权利要求5所述的测序文库核酸，其中所述DNA聚合酶是具有链置换活性的DNA聚合酶。

7.根据权利要求1所述的测序文库核酸，其中所述第一核酸链包含分子条形码。

8.根据权利要求1所述的测序文库核酸，其中所述第二核酸链包含分子条形码。

9.根据权利要求1所述的测序文库核酸，其中所述第一核酸链包含衔接子序列。

10.根据权利要求1所述的测序文库核酸，其中所述第二核酸链包含衔接子序列。

11.根据权利要求9或10所述的测序文库核酸，其中所述衔接子序列与测序平台一起使用。

12.根据权利要求1所述的测序文库核酸，其中所述第一核酸链包含通过引入生物素标记的ddNTP生成的随机3’末端以终止延伸。