[发明专利]从多穗石柯叶片中提取根皮苷的方法

说明书

本发明公开了一种从多穗石柯叶片中提取根皮苷的方法，将多穗石柯叶片进行研磨，得到叶片粉末；将叶片粉末与乙醇水溶液混合均匀，再放入索氏提取器中，回流提取得到第一提取液，将第一提取液进行过滤，得到滤渣和第一提取液滤液，在滤渣中加入乙醇水溶液，再放入索氏提取器中，回流提取得到第二提取液，将第一提取液滤液和第二提取液混合，得到提取液，浓缩提取液，再冷冻干燥得到干粉；将干粉在第一层析柱中静态吸附，在第二层析柱中静态吸附，用乙醇水溶液对第二层析柱进行冲洗，得到第二洗脱液后进行蒸发，得到根皮苷干粉，本发明方法采用回流提取有机溶剂提取根皮苷的方式，大大缩短了有机溶剂浸提的时间，降低了后期纯化的难度。

技术领域

本发明属于黄酮类化合物提取技术领域，具体来说涉及一种从多穗石柯叶片中提取根皮苷的方法。

背景技术

根皮苷是根皮素的2'-β-D-葡萄糖苷，为黄酮类中的二氢查尔酮苷。近年，根皮苷在多领域的作用被人们所发现。在医学方面除了用于糖尿病及其并发症的防治以外，对骨质疏松、记忆力减退、肥胖症以及心脑血管病都被证实有不错的防治效果。在化妆品行业,根皮苷可代替熊果苷作为增白剂。更能减缓皮脂的分泌,降低痤疮的发生。此外，根皮苷的甜度为葡萄糖的300倍，可用做天然非糖替代品又因其具有黄酮类的基本性质与功效可作为抗氧剂直接添加到食品中，在化学、食品、医学等领域均有广泛前景。壳斗科植物多穗石柯是一种富含根皮苷的植物，黄酮类化合物含量高达22.2％，其中根皮苷含量占黄酮总量的12.6％，是其他植物含量的数倍，是提取根皮苷绝佳原料。

迄今为止根皮苷提取的方法包括了煎煮法，虽成本低廉、设备简单、无毒安全但由于根皮苷不易溶于水，易溶于有机溶剂的特性，会出现提取液中杂质较多，收率较低等问题。

微波提取法通过在微波场中，对溶液中的部分组分被选择性加热，从而达到目标产物从基质中被溶解出的目的。目前微波提取还处于起步阶段受限于该微波设备和技术，且根皮苷热稳定性不佳等因素，难以达到预期目的。超声提取在直接打破细胞实现有效成分的溶出的同时，其他杂质也随着溶出加大了纯化的难度，对容器的要求高设备成本高也是超声提取的缺点。醇提法多采用乙醇安全无毒，较高程度上减少水溶性杂质的浸出，而回流提取又能减少有机试剂的用量且对设备的要求不高。

目前分离纯化根皮苷的主要方法有:大孔树脂吸附法、聚酰胺层析柱分离法、化学萃取法、絮凝法、高效离心分配色谱法(HPCPC)和高速逆流色谱法(HSCCC)。总体来看，以上方法虽均能达到纯化目的，但各自均有缺点。如絮凝法中PAC的产率较低而壳聚糖纯化效果差，HPCPC与HSCCC设备昂贵，单次样品制备量少，化学萃取与中试剂毒性等问题。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种从多穗石柯叶片中提取根皮苷的方法，该方法尤其适用于实验用途，其采用聚酰胺与大孔树脂联用的分离方法，使粗提物在聚酰胺层析柱实现黄酮的分离后，在通过大孔树脂得到根皮苷，具有操作简单、分离效果好、负载量高、再生处理简单、解吸条件温和、使用周期长、吸附速度快且使用洗脱剂乙醇安全不污染环境成本低廉等优点。

本发明的目的是通过下述技术方案予以实现的。

一种从多穗石柯叶片中提取根皮苷的方法，包括以下步骤：

1)将多穗石柯叶片进行研磨，过100～200目筛，得到叶片粉末；

2)回流提取：将M₁g叶片粉末与V₁mL且乙醇体积浓度为70～80％的乙醇水溶液混合均匀，再放入索氏提取器中，回流提取至少4h后得到第一提取液，将第一提取液进行过滤，得到M₂g滤渣和第一提取液滤液，在M₂g滤渣中加入V₂mL且乙醇体积浓度为70～80％的乙醇水溶液，再放入索氏提取器中，回流提取至少4h后得到第二提取液，其中，M₁：V₁＝1:(10～20)，M₂：V₂＝1:(10～20)；