[发明专利]幽门螺杆菌耐药性的高分辨熔解的检测引物、检测试剂盒及应用与检测方法

说明书

本发明提供了幽门螺杆菌耐药性的高分辨熔解的检测引物、检测试剂盒及应用与检测方法，属于生物检验检疫领域。本发明提供的幽门螺杆菌耐药性的高分辨熔解的检测引物能根据幽门螺杆菌的不同突变，精确检测；特异性强，具有较好的目的性，而检测试剂盒更加方便进行检测，而将检测引物或检测试剂盒应用到幽门螺杆菌耐药性的检测中，能提高检测的准确性；幽门螺杆菌耐药性的高分辨熔解检测方法过PCR然后高分辨熔解，能较好的区分出耐药性菌与非耐药菌，结果准确，数据可靠。

技术领域

本发明涉及生物检验检疫领域，具体而言，涉及幽门螺杆菌耐药性的高分辨熔解的检测引物、检测试剂盒及应用与检测方法。

背景技术

幽门螺杆菌为革兰阴性杆菌，其与罹患胃癌的风险密切相关。 2015年京都共识提出根除幽门螺杆菌作为胃癌的一级预防。但是近年来幽门螺杆菌的根除疗效逐渐下降，已由三联疗法调整为四联疗法，疗程亦由7天调整为14天，但其根除率仍不可观，其主要原因为抗生素耐药，且耐药现象越来越严重。因此幽门螺杆菌的根除治疗急需个体化治疗。目前判断其对某种抗生素耐药的方法主要为药敏试验，但是药敏试验耗时、耗力，价格高昂，临床不易实施。因此急需一种快速、简便、低廉的方法检查幽门螺杆菌对抗生素的耐药情况。

通过测序(DNA sequencing)、限制性片段多态性法 (restrictionfragmentlength polymorphism，RFLP)、基因芯片(DNA chip)、实时定量PCR(real-time polymerasechain reaction RT-PCR)、荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridisationFISH)进行检测价格高昂、耗时、耗力，因此导致应用有限，需要开发成本低廉、方便使用的检测试剂和检测方法。

发明内容

本发明的第一目的在于提供幽门螺杆菌耐药性的高分辨熔解的检测引物，利用该检测试剂，能够快速准确且方便的鉴定出幽门螺杆菌的耐药性情况。

本发明的第二目的在于提供上述的幽门螺杆菌耐药性的高分辨熔解的检测引物在幽门螺杆菌耐药性的检测中的应用；上述检测引物在幽门螺杆菌检测中的应用，能更好提高检测的准确性。

本发明的第三目的在于提供幽门螺杆菌耐药性的高分辨熔解的检测试剂盒，该检测试剂盒方便实施检测，检测准确性高，效果明显。

本发明的第四目的在于提供幽门螺杆菌耐药性的高分辨熔解检测方法，该检测方法操作简单，准确性高，具有较好的识别度。

为了实现本发明的上述目的，采用以下技术方案：

幽门螺杆菌耐药性的高分辨熔解的检测引物，检测引物包括如 SEQ ID NO.1-2所示的检测引物对。

上述的幽门螺杆菌耐药性的高分辨熔解的检测引物在幽门螺杆菌耐药性的检测中的应用。

幽门螺杆菌耐药性的高分辨熔解的检测试剂盒，检测试剂盒包括如上述的幽门螺杆菌耐药性的高分辨熔解的检测引物。

上述的幽门螺杆菌耐药性的高分辨熔解的检测试剂盒在检测幽门螺杆菌耐药性中的应用。

幽门螺杆菌耐药性的高分辨熔解检测方法，检测方法包括以下步骤：

提取待检样本的基因组DNA，并设置阳性对照和阴性对照，以基因组DNA以及阳性对照和阴性对照为模板，进行PCR反应，PCR 反应结束后，根据与阳性对照和阴性对照进行对比高分辨熔解分析，得到幽门螺杆菌耐药性数据。