[发明专利]一种葡萄糖氧化酶传感器的制备方法及其对葡萄糖的检测

权利要求书

1.一种葡萄糖氧化酶传感器的制备方法，其特征在于，所述方法步骤为：

(1)将10-80mL的H₂O和80-200mL的0.01-0.5mol/LHAuCl₄加入三颈瓶中，在机械搅拌和回流冷凝的条件下加热至沸，快速加入0.1-1.0mL的5-50mmol/L的柠檬酸钠溶液，加热反应5-50min后，停止加热，在搅拌回流冷凝下冷至室温，获得合成的金纳米粒子；

(2)将干净的玻碳电极置于含有0.5～5.0mmol/L的HAuCl₄溶液中，于1.5V～-0.3V范围内，以扫速50～150mV/s循环伏安扫描5～50圈，制得纳米金修饰的玻碳电极；

(3)将纳米金修饰的玻碳电极置于含有0.1～15mmol/L的CoCl₂、0.1-10mmol/L的K₃Fe(CN)₆和0.01-0.2mol/L的KCl混合溶液中，于0.1-1.0V范围内以扫速50～150mV/s循环伏安扫描5-50圈，制得铁氰化钴/金纳米粒子修饰玻碳电极；

(4)将铁氰化钴/金纳米粒子修饰玻碳电极在步骤(1)合成的金纳米粒子中反应10-80min，利用氰金键作用，形成金纳米粒子/铁氰化钴/金纳米粒子修饰玻碳电极；

(5)将金纳米粒子/铁氰化钴/金纳米粒子修饰玻碳电极在100-10000U/mL的葡萄糖氧化酶中静置10-80min，将酶固定到电极表面；最后滴加0.05％-1.0％的戊二醛和稀释了1-15倍的新鲜蛋清混合液1.0-50μL，制得葡萄糖氧化酶传感器；

所述葡萄糖氧化酶传感器对葡萄糖的检测方法如下：

利用所述葡萄糖氧化酶传感器的葡萄糖氧化酶催化氧化葡萄糖生成产物过氧化氢，然后铁氰化钴电子介体催化还原过氧化氢，铁氰化钴的还原电流随着葡萄糖浓度的增加而增大，实现对葡萄糖的检测，将前述的葡萄糖氧化酶传感器为工作电极，参比电极为Ag/AgCl电极，辅助电极为铂电极，组成三电极体系，即可实现对葡萄糖的检测；

所述葡萄糖氧化酶传感器用于检测葡萄糖的线性范围为5.0×10^-6～1.2×10^-4mol/L，检测限为1.9×10^-6mol/L。