[发明专利]一种建立向日葵抗列当水平标准的方法

说明书

本发明公开了一种建立向日葵抗列当水平标准的方法，包括以下步骤：（1）向日葵列当种子的清洁和表面消毒；（2）向日葵种子的催芽；（3）向日葵根系分泌物收集；（4）向日葵列当种子的预处理；（5）向日葵列当种子的接种；（6）向日葵列当种子萌发率、寄生瘤结数及出茎数的观察和统计。本发明建立室内条件下快速诱导向日葵列当萌发，从多个参数中筛选出影响较大的参数指标，由于列当种子的萌发率在不同抗性水平品种之间无显著差异，而瘤节形成数在不同抗性水平品种间差异显著，所以用列当寄生的瘤结数作为评价向日葵抗列当水平的标准。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种建立向日葵抗列当水平标准的方法。

背景技术

向日葵列当又称毒根草、兔子拐棍，是一年生草本植物，属双子叶植物，列当科。国内分布在河北、北京、新疆、山西、内蒙古、黑龙江、辽宁、吉林等省。主要为害向日葵、西瓜、甜瓜、豌豆、蚕豆、胡萝卜、芹菜、烟草、亚麻、番茄等。寄生在根部。向日葵列当是目前严重威胁向日葵产业发展的一个主要病害，在我国的向日葵产区均有发生，但以新疆、内蒙古地区发生最为严重。向日葵被列当寄生后，致植株矮小、瘦弱，不能形成花盘，最后全株枯死。筛选和培育抗列当的向日葵品种是目前最为有效的防治列当的措施。而在室内条件下建立一种快速筛选和鉴定不同向日葵品种的抗列当水平的体系是向日葵抗列当育种的前提和基础，但是目前筛选方法较多，没有统一的标准，筛选的参数指标较多，工作量较大。目前已有的营养钵鉴定法在操作过程中有很多的缺点，如该方法需要大量列当种子和土壤按一定比例进行混合；在后期列当数量统计前的洗涤工作，需要大量的人力和时间；该体系不利于观察列当的各个发育阶段。

专利申请号为201611263115.5的发明专利提供一种室内条件下快速诱导向日葵列当萌发的方法，即培养皿滤纸法，有以下几个关键步骤：(1)将预先催芽的向日葵幼苗置于铺有滤纸的13×13cm的塑料方皿中培养；(2)向日葵列当种子的清洁和消毒后用向日葵幼苗的根系分泌进行物预处理；(3)向日葵列当种子接种，将预处理好的向日葵列当种子随同滤纸一并移入有向日葵幼苗的方形培养皿中，用封口膜将培养皿封好后放置在光照培养箱中培养，添加蒸馏水保证滤纸处于湿润的状态；(4)列当种子的萌发和寄生瘤的形成的观察和寄生率的计数，但是该专利并没有从多个参数进行比较没有制定出建立向日葵抗列当水平标准的方法。

发明内容

针对上述现有技术存在的问题，本发明提供一种建立向日葵抗列当水平标准的方法，建立室内条件下快速诱导向日葵列当萌发，从多个参数中筛选出影响较大的参数指标，由于列当种子的萌发率在不同抗性水平品种之间无显著差异，而瘤节形成数在不同抗性水平品种间差异显著，所以用列当寄生的瘤结数作为评价向日葵抗列当水平的标准。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种建立向日葵抗列当水平标准的方法，包括以下步骤：

(1)向日葵列当种子的清洁和表面消毒；

(2)向日葵种子的催芽；

(3)向日葵根系分泌物收集；

(4)向日葵列当种子的预处理；

(5)向日葵列当种子的接种；

(6)向日葵列当种子萌发率、寄生瘤结数及出茎数的观察和统计。

优选的是，所述步骤(1)具体包括：

(1.1)将向日葵列当种子过筛网去除杂质；

(1.2)首先用蒸馏水进行震荡清洗，之后用次氯酸钠溶液充分震荡后静置，弃上清液；

(1.3)加入乙醇，震荡后静置，弃上清液，之后无菌水冲洗；

(1.4)将清洗后的列当种子进行干燥，收集。

上述任一方案优选的是，所述步骤(1.1)中筛网孔径为0.18mm，去除杂质后置于1.5ml离心管中。