[发明专利]一种肽指纹图谱的快速质谱分析与谱图判别方法

权利要求书

1.一种肽指纹图谱的快速质谱分析与谱图判别方法，包括试剂盒，所述试剂盒包括盒体、用于预处理生物样本的多孔硅材料、缓冲溶液及质谱基质，其特征在于包括以下步骤：

1)制备多孔硅微粒，并进行表面化学修饰；

2)利用多孔硅微粒富集生物样本中的多肽类物质；

3)将捕获有生物样本的多肽类物质的多孔硅颗粒与质谱基质混合后直接点靶，进行颗粒原位质谱检测；

4)通过统计学算法及人工神经网络构建基于血清肽指纹谱的判别预测模型。

2.根据权利要求1所述的一种肽指纹图谱的快速质谱分析与谱图判别方法，其特征在于：所述步骤1)的具体过程如下：先将硅晶圆片固定在电解槽中，硅片为阳极，对电极为阴极，以氢氟酸与乙醇混合溶液作为刻蚀液，并设置设置合适的直流电源及刻蚀时间；刻蚀完毕后更换所述刻蚀液剥离多孔硅层；接着将剥离得到的多孔硅层超声粉碎，得到多孔硅微粒；最后所述多孔硅微粒通过修饰基团进行表面化学修饰。

3.根据权利要求2所述的一种肽指纹图谱的快速质谱分析与谱图判别方法，其特征在于：所述步骤2)的具体过程如下：先将生物样本用缓冲溶液适当稀释，然后将稀释生物样本取适量加入0.1-1mg多孔硅微粒中，低速震荡10-30min后离心，去除上清液后用缓冲溶液多次清洗。

4.根据权利要求3所述的一种肽指纹图谱的快速质谱分析与谱图判别方法，其特征在于：所述步骤3)的具体过程如下：在上述清洗过的多孔硅颗粒中加入适量去离子水，经过震荡混匀后将所述多孔硅微粒转移至M1LDI靶上进行质谱检测。

5.根据权利要求1或4所述的一种肽指纹图谱的快速质谱分析与谱图判别方法，其特征在于：所述步骤4)的具体过程如下：首先将质谱检测得到的多肽图谱进行平滑及减基线处理，后用统计学软件进行t检验挑选出各个生物样本之间有显著差异的多肽特征峰，经过进一步选择得到特征峰，将产生的特征峰数据输入人工神经网络软件中建立判别预测模型。

6.根据权利要求2所述的一种肽指纹图谱的快速质谱分析与谱图判别方法，其特征在于：所述多孔硅微粒具有微米尺度的颗粒，所述多孔硅微粒内含高密度纳米尺度垂直孔道，且孔径精细可调。

7.根据权利要求6所述的一种肽指纹图谱的快速质谱分析与谱图判别方法，其特征在于：所述修饰基团包括金属颗粒、烷基羧酸、季铵盐等其中的一种或多种。

8.根据权利要求7所述的一种肽指纹图谱的快速质谱分析与谱图判别方法，其特征在于：将捕获有生物样本的多肽类物质的多孔硅颗粒直接点靶覆盖质谱基质后进行原位质谱检测，无需洗脱。

9.根据权利要求8所述的一种肽指纹图谱的快速质谱分析与谱图判别方法，其特征在于：所述生物样本为血清、血浆、血液、尿液、唾液、汗液、脑脊液、组织细胞裂解液等其中的一种或多种。