[发明专利]鸡安卡拉病毒Hexon蛋白间接ELISA检测方法在审
申请号: | 201810793339.X | 申请日: | 2018-07-18 |
公开(公告)号: | CN108872577A | 公开(公告)日: | 2018-11-23 |
发明(设计)人: | 李佩国;吴同磊;李蕴玉;常超越;张香斋;贾青辉 | 申请(专利权)人: | 河北科技师范学院 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/558 |
代理公司: | 长沙星耀专利事务所(普通合伙) 43205 | 代理人: | 许伯严 |
地址: | 066600 河北省秦*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 包被 间接ELISA检测 最佳稀释度 阳性血清 稀释度 抗原 病毒 血清稀释度 重复性检测 包被抗原 底物显色 酶标二抗 阴性血清 重组蛋白 血清 避光 二抗 显色 一抗 蛋白 采集 保存 | ||
1.一种采用间接ELISA方法检测鸡安卡拉病毒的方法,其特征在于:采用纯化的GST-hexon重组蛋白作为包被抗原,以兔抗鸡酶标作为二抗,进行的安卡拉阳性血清的间接ELISA方法检测。
2.如权利要求1所述的一种采用间接ELISA方法检测鸡安卡拉病毒的方法,其特征在于,所述抗原的最佳的包被浓度为0.125µg/mL,血清稀释度为1:400,包被条件为37℃ 1h,4℃过夜,二抗稀释度为1:4000,底物显色时间为10min。
3.如权利要求1所述的一种采用间接ELISA方法检测鸡安卡拉病毒的方法,其特征在于,所述ELISA的临界值为0.084。
4.如权利要求1所述的一种采用间接ELISA方法检测鸡安卡拉病毒的方法,其特征在于,所述GST-hexon重组蛋白的制备方法为:选择Hexon结构蛋白基因设计引物,以尿囊液为模板进行PCR,将回收PCR产物和表达载体质粒pGEX6P-1同时用
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