[发明专利]一种丁烷氧化菌培养基及培养管在审
申请号: | 201810801629.4 | 申请日: | 2018-07-20 |
公开(公告)号: | CN110734860A | 公开(公告)日: | 2020-01-31 |
发明(设计)人: | 杨帆;高俊阳;许科伟;顾磊;宁丽荣;卢丽;汤玉平 | 申请(专利权)人: | 中国石油化工股份有限公司;中国石油化工股份有限公司石油勘探开发研究院 |
主分类号: | C12N1/00 | 分类号: | C12N1/00;C12M1/24;C12M1/00;C12Q1/04 |
代理公司: | 11372 北京聿宏知识产权代理有限公司 | 代理人: | 吴大建;陈伟 |
地址: | 100728 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 丁烷氧化菌 培养基 培养管 油气微生物勘探 测试要求 实际工程 实验流程 特异性强 检测 优化 安全 | ||
本发明涉及一种丁烷氧化菌培养基及培养管。该培养基特异性强,能够精确获取丁烷氧化菌数量;同时根据实际工程需求及实验室具体测试要求,提供了一种适用于MPN检测方法的丁烷氧化菌培养管,满足了工程和实验的需求,优化了实验流程,使得油气微生物勘探中丁烷氧化菌的检测更可靠、更安全、准确性更高。
技术领域
本发明属于油气微生物勘探中油气指示微生物检测技术领域,具体涉及一种丁烷氧化菌培养基及培养管。
背景技术
传统的油气微生物勘探技术是通过对地表土壤样品中油气指示微生物富集培养、分离以及微生物代谢产物的生理、生化分析来研究土壤中油气微生物的异常,根据油气指示菌的数量分布来预测油气藏的存在,其中丁烷氧化菌已经被证明是一种有效的油气微生物勘探指标。50年代,Phillips石油公司开发了一种油气微生物勘测技术-MOST(MicrobialOil Survey Technique)技术,利用丁烷氧化菌的高抗丁醇的特性来探索烃类微渗漏现象;中国农业大学采用丁烷选择培养法,对多个油气田地表土壤样品中的丁烷氧化菌进行了分离,纯化。长江大学利用丁烷氧化菌对非常规油气藏的预测开展了大量研究。在油气微生物勘查中最重要的环节是微生物室内检测。目前培养法仍然是油气微生物检测的主流方法,其中最大可能数法(MPN法)是最经典的方法之一。MPN法是微生物活菌数测定的经典方法,根据土壤稀释菌液接种培养后所生长的微生物的试管数,用统计数学方法计算出原始的含菌量。该方法的好处在于能够比较准确的确定土壤样品中微生物的数量,而且操作方法比较简单。目前对土壤样品中丁烷氧化菌的检测是油气微生物勘探的主要手段。
利用MPN法检测丁烷氧化菌数量一般将土壤稀释液加入到装有丁烷氧化菌培养基的玻璃试管中,之后充入丁烷气体进行培养。目前现有技术存在的问题有以下几点:1、丁烷氧化菌对地下油气藏具有很好的指示性,对油气勘探具有一定的指导意义,但实验室内丁烷氧化菌培养分离所涉及的培养基各研究单位不尽相同,没有统一的标准,更没有相互对比哪种培养基的检测精度较高;2、目前MPN法检测丁烷氧化菌数量主要是采用玻璃试管充气培养的方法,采用玻璃试管进行培养时存在以下几点问题:①丁基橡胶塞密封性不可靠,充入丁烷气体后试管内产生正压,容易在培养过程中发生漏气,造成碳源供给不足,导致检测结果出现误差。②丁烷为易燃易爆气体,在充气以及培养过程中存在安全隐患;③工程上大量样品需要上千个培养试管的工作量,配置培养基周期加长,影响土壤保存的时效性,会造成实验结果失真。因此,现有的玻璃试管充气培养方法存在局限性。
因此,目前存在的问题是急需研究开发一种特异性程度较高的丁烷氧化菌培养基,以及一种密封性好、安全性高、制作简单、测试效率更高的培养管。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对上述现有技术的不足,提供一种丁烷氧化菌培养基及培养管。本发明针对丁烷氧化菌生理生化特征,提供了一种适用于油气微生物勘探的丁烷氧化菌培养基配方,同时根据实际工程需求及实验室具体测试要求,提供了一种适用于MPN检测方法的丁烷氧化菌培养管,本发明的培养基和培养管克服了原有丁烷氧化菌检测中所存在的弊端,满足了工程和实验的需求,优化了实验流程,使得油气微生物勘探中丁烷氧化菌的检测更可靠、更安全、准确性更高。
为此,本发明第一方面提供了一种丁烷氧化菌培养基,其包含氯化铵、硫酸铵、磷酸氢二钾、硝酸钠、硫酸镁、氯化钾、磷酸二氢钠、氯化铁、丁醇、刃天青、微量元素化合物和蒸馏水;其中,所述微量元素包含锰、锌、镍、硼、钼和铜。
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