[发明专利]一种粒细胞或单核细胞标记系统及其标记方法和应用

权利要求书

1.一种粒细胞或单核细胞前体标记系统，其特征在于，所述标记系统包括Ms4a3基因-IRES-Cre重组酶，LoxP-Stop-LoxP-报告基因；所述Ms4a3基因是粒细胞或单核细胞前体GMP所特异性表达的基因，其序列如SEQ ID NO.1所示；所述Cre重组酶是指来源于P1噬菌体的Cre重组酶，其序列如SEQ ID NO.4所示。

2.如权利要求 1所述的粒细胞或单核细胞前体标记系统，其特征在于，所述Ms4a3基因驱动所述Cre重组酶的表达，所述Cre重组酶切割报告基因上游两个LoxP之间的终止信号Stop序列，从而解除终止信号Stop对报告基因表达的阻止，所述报告基因进行表达，完成对特定粒细胞或单核细胞前体的标记。

3.一种标记组合物，其特征在于，所述标记组合物包括如权利要求1所述的粒细胞或单核细胞前体标记系统。

4.一种体外诊断试剂，其特征在于，所述体外诊断试剂包括如权利要求1所述的粒细胞或单核细胞标记系统、或如权利要求3所述的标记组合物。

5.如权利要求1所述的粒细胞或单核细胞前体标记系统、或如权利要求3所述的标记组合物在非治疗与诊断目的的对粒细胞或单核细胞标记中的应用。

6.一种非治疗与诊断目的的粒细胞或单核细胞前体的标记方法，其特征在于，所述标记方法包括以下步骤：

步骤1：向粒细胞或单核细胞前体中导入如权利要求1所述的粒细胞或单核细胞标记系统；

步骤2：Ms4a3基因驱动Cre重组酶在细胞中特异性表达；

步骤3：Cre重组酶识别并切割报告基因上游的终止信号Stop序列，从而解除终止信号Stop对报告基因表达的抑制；

步骤4：报告基因表达，完成对细胞的标记；

步骤5：通过流式细胞检测或荧光显微镜检测。

7.一种粒细胞和单核细胞前体标记系统的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下步骤：

在粒细胞和单核细胞前体的Ms4a3基因后接入IRES-Cre序列，形成Ms4a3-IRES-Cre，实现Ms4a3驱动下的Cre重组酶的表达；

（2）将Ms4a3-IRES-Cre与LoxP报告系统整合，即可构建得到所述粒细胞和单核细胞前体标记系统。