[发明专利]一种甜叶菊糖液的提取方法

说明书

本发明公布了一种甜叶菊糖液的提取方法，其做法是将甜叶菊叶片粉碎后放入蒸馏水中浸提，将浸提液倒入层析柱中过滤，然后用酸、碱洗去可溶性杂质，最后用70%的酒精解离出糖液。利用这种方法可有效减少甜叶菊叶中色素析出，提高糖液的纯度，快速准确地识别高效液相色谱检测图中各糖苷峰图，为准确计算出各糖苷含量奠定基础。

技术领域

一种甜叶菊糖液的提取方法，涉及植物体内各化学组分分离、提取和检测技术领域，更具体的说是一种利用层析柱分离提取甜叶菊糖液的方法。

背景技术

甜叶菊是菊科多年生草本植物，原产南美巴拉圭，现世界各地引种栽培均获得成功。甜叶菊叶片中含有的甜菊糖甙甜度是蔗糖的250-300倍，但所含热量仅是蔗糖的1/300，是目前已知最甜的天然甜味剂，已经替代糖精在食品、医药等工业中得到广泛应用，并对肥胖症、低血糖、糖尿病、小儿龋齿、高血压、心脏病等具有一定的防治效果和辅助治疗作用，是继甘蔗糖、甜菜糖之外有开发价值和健康推崇的天然蔗糖替代品，被国际上誉为“世界第三健康糖源”。

甜叶菊叶片中含有的甜味成分主要有十种，分别为甜叶菊糖苷 (STV ) ，甜叶菊醇双糖苷( STB ) ，莱鲍迪苷 A，B，C，D，F，M( RA，RB，RC，RD，RF，RM ) , 杜尔可苷 A( DA )和甜茶苷（RUB）。其中，STV和RA所占比例最大，一般为90%。不同甜菊糖苷的口感和甜度都各不相同， RA的甜度高于甜菊苷 STV且口味优于 STV，因此将 RA 的含量及所占比例作为甜叶菊品种和甜菊糖苷质量评价的主要指标。

甜叶菊糖苷测定一般采用高效液相色谱法，操作简单，准确率高，但对甜叶菊糖提取液纯度要求较高。若提取液中含有较多杂质，测定操作时基线较难跑平稳，色谱图中也较难准确识别各个糖苷峰图，尤其是RM和RD出峰时间较早，极易同一些杂质峰混淆在一起。常规的离心和超声波提取糖液的方法虽然简单省时，但提取的糖液中杂质较多，影响测定的准确性。

本发明采用树脂层析柱法提取甜叶菊糖液，向浸提液中加入冰乙酸调PH值为4.5~5.0，较好地减少甜叶菊叶片中的色素析出；同时糖液过滤后分别用0.5%氢氧化钠和0.5%盐酸除去溶于酸碱的杂质，提高糖液的纯度，为准确计算各组分糖苷含量奠定了基础。

发明内容

本发明的目的在于尽可能减少或抑制甜叶菊叶片浸提过程中色素的析出，除去糖液中可溶于酸、碱的杂质，提高检测糖液的纯度，以便快速准确识别高效液相检测色谱图中各糖苷峰图，准确计算出各糖苷含量。

本发明是这样实现的：

一种甜叶菊糖液的提取方法，其特征是，它包括以下技术环节：

①浸提：称取甜叶菊叶片粉末2.0~2.5克装入无纺布袋中，将布袋放入150毫升烧杯中，加入100毫升65℃蒸馏水浸提，用冰乙酸将蒸馏水PH值调为4.5~5.0，水浴保温，60分钟后倒出浸提液，重复浸提3~4次；

②过滤：将全部浸提液倒入层析柱中进行吸附过滤，滴速为1滴/3秒；

③酸碱洗涤：先后向层析柱中加入180~300毫升0.5%盐酸和180~300毫升0.5%氢氧化钠进行洗涤，酸、碱洗涤后分别用蒸馏水冲洗到滴液PH值为7，酸、碱冲洗时滴速为1滴/秒，蒸馏水冲洗不限流速，自然下流；

④糖液解离：向层析柱中加入250毫升70%的酒精解离树脂吸附的糖，层析柱下端用烧杯接取糖液，滴速为1滴/3秒；

⑤检测：糖液用孔径为0.45微米的针头过滤器过滤后用高效液相色谱进行糖甙含量测定。

本发明的有益效果：