[发明专利]用于Wnt途径相关疾病的抗体和方法

说明书

跨膜E3泛素连接酶ZNRF3和RNF43是真核细胞中β‑联蛋白和Wnt信号转导途径的负调节物。与ZNRF3的胞外域结合的抗体可以调节ZNRF3的活性，从而导致Wnt信号转导的增强。ZNRF3拮抗抗体可以用来治疗具有弱Wnt信号转导的疾病，如短肠综合征、骨质疏松、糖尿病、神经变性疾病和黏膜炎。此外，本发明的拮抗抗体可以用来增强Wnt信号转导以用于组织修复和伤口愈合。

本申请是中国专利申请201280060847.8的分案申请，原申请的申请日是2012年10月12日，发明名称是“用于Wnt途径相关疾病的抗体和方法”。

技术领域

本发明广泛涉及结合受体的单克隆抗体，尤其涉及结合ZNRF3蛋白或RNF43蛋白的抗体。

背景技术

Wnt信号转导途径是真核细胞中对调节细胞生长和分化重要的蛋白质网络。LoganCY和Nusse R,“The Wnt signaling pathway in development and disease.”Annu.Rev.Cell.Dev.Biol.20:781-810(2004)；Nusse R.,“Wnt signaling in diseaseand in development.”Cell Res.15(1):28-32(2005年1月)；Clevers H,“Wnt/beta-catenin signaling in development and disease.”Cell 127(3):469-80(3Nov.2006)。Wnt信号转导对在胚胎发育过程中调节细胞生长和分化至关重要。在成体中，Wnt信号转导促进组织稳态。

已将Wnt信号转导的调节异常与许多人类疾病相联系。Wnt途径异常的过度激活可以涉及引起结直肠癌的肿瘤发生。相反，已将Wnt信号转导的病理性低水平与骨质疏松、骨关节炎、多囊肾病和神经变性疾病相联系。已显示Wnt途径的受控激活促进诸如组织修复和伤口愈合的再生过程。Zhao J,Kim KA和Abo A,“Tipping the balance:modulating theWnt pathway for tissue repair.”Trends Biotechnol.27(3):131-6(2009年3月)。

Wnt蛋白是结合细胞表面受体(“Wnt受体复合体”)来激活细胞中的Wnt途径的蛋白质配体。已鉴定了典型和非典型的几种Wnt途径。

通过典型Wnt/β-联蛋白途径的Wnt信号转导调节转录辅因子蛋白β-联蛋白的细胞周转。MacDonald BT,Tamai K和He X,“Wnt/beta-catenin signaling:components,mechanisms,and diseases.”Dev.Cell 17(1):9-26(2009年7月)及标题为“Evaluatingand treating scleroderma”的美国专利申请2009/0220488。在缺乏Wnt配体的情况下，β-联蛋白通过多蛋白“破坏复合体”保持磷酸化，其引起β-联蛋白的多遍在蛋白化及β-联蛋白在细胞蛋白体中的降解。在Wnt结合Wnt受体复合体时，β-联蛋白通过抑制“破坏复合体”而得以稳定。然后β-联蛋白易位至细胞核。在细胞核中，β-联蛋白激活Wnt靶基因的转录，从而激活用于细胞生长和分化的基因表达程序。

在典型Wnt/β-联蛋白途径中，Frizzled(FZD)蛋白和低密度脂蛋白受体相关蛋白5/6(LRP5/6)形成受体复合体。Frizzled蛋白和LRP5/6对典型Wnt/β-联蛋白途径都很重要。