[发明专利]一种同时检测七个氨基糖胺类耐药基因的多重液相基因芯片引物、试剂盒及其分析方法

权利要求书

1.一种同时检测七个氨基糖胺类耐药基因的多重液相基因芯片引物，其特征在于，所述的氨基糖胺类耐药基因为：aac(6’)-Ie-aph(2”)-Ia，aph(3’)-IIIa，ant(4’)-Ia，ant(9)-Ia，aadE， aph (3’)-Ia和aph(3”)-Ib；

各个氨基糖胺类耐药基因所述引物核苷酸序列如下所示：

aac(6’)-Ie-aph(2”)-Ia检测引物：

引物P1： AGAGCAATAAGGGCATACCAAA（SEQ ID NO：1），

引物P2：CCACACTATCATAACCACTACCGA（SEQ ID NO：2）；

所述引物P1和P2其中一条引物的5’端被生物素化；

aph(3’)-IIIaa检测引物：

引物P3：AGACGGAAAAGCCCGAAGA（SEQ ID NO：3），

引物P4：GCAGAAGGCAATGTCATACCA（SEQ ID NO：4）；

所述引物P3和P4其中一条引物的5’端被生物素化；

ant(4’)-Ia检测引物：

引物P5：AATCGGTAGAAGCCCAAAAGT（SEQ ID NO：5），

引物P6：TGGTAGAAATGTTGTCGGTCC（SEQ ID NO：6）；

所述引物P5和P6其中一条引物的5’端被生物素化；

ant(9)-Ia检测引物：

引物P7：TGGTTCAGCAGTAAATGGTGGT （SEQ ID NO：7），

引物P8：ATTGCCAAGGGACAACTTCACT（SEQ ID NO：8）；

所述引物P7和P8其中一条引物的5’端被生物素化；

aadE检测引物：

引物P9：AGAAACTTTTGTCCACCTACCG（SEQ ID NO：9），

引物P10：AATGAAGCCTTTCCGCCA（SEQ ID NO：10）；

所述引物P9和P10其中一条引物的5’端被生物素化；

aph (3’)-Ia检测引物：

引物P11：AGCCGTTTCTGTAATGAAGGAG（SEQ ID NO：11），

引物P12：GTGATTTTGATGACGAGCGTAA（SEQ ID NO：12）；

所述引物P11和P12其中一条引物的5’端被生物素化；

aph(3”)-Ib检测引物：

引物P13：GGGTCCAATCGCAGATAGAA（SEQ ID NO：13），

引物P14：GCTAACGCCGAAGAGAACTG（SEQ ID NO：14）；

所述引物P13和P14其中一条引物的5’端被生物素化。

2.根据利要求1所述的同时检测七个氨基糖胺类耐药基因的多重液相基因芯片引物，其特征在于，所述引物P1和P2，P3和P4，P5和P6，P7和P8，P9和P10，P11和P12，P13和P14中未被生物素化的引物的5’端连接有tag序列，所述tag序列能与荧光编码微球中带有的anti-tag序列互补配对。

3.根据权利要求2所述的同时检测七个氨基糖胺类耐药基因的的多重液相基因芯片引物，其特征在于，所述引物P1和P2、P3和P4、P5和P6、P7和P8，P9和P10，P11和P12，P13和P14这7组引物对中连接的tag序列选自SEQ ID NO：15~21所示的tag序列，且该7组引物对中连接的tag序列互不相同。

4.一种同时检测七个氨基糖胺类耐药基因的多重液相基因芯片试剂盒，其特征在于，该试剂盒中含有权利要求1~3任一所述引物。

5.根据权利要求4所述的同时检测七个氨基糖胺类耐药基因的多重液相基因芯片试剂盒，其特征在于，该试剂盒中还含有链霉亲和素-藻红蛋白复合物、7种编码不同荧光色的荧光编码微球。