[发明专利]Ce6嵌入型红细胞膜包裹普鲁士蓝纳米颗粒的制备方法

权利要求书

1.Ce6嵌入型红细胞膜包裹普鲁士蓝纳米颗粒的制备方法，其特征在于：包含以下步骤：

（1）将一定量的柠檬酸分别溶解在三氯化铁溶液和亚铁氰化钾溶液中，分别得到含柠檬酸的三氯化铁混合溶液和含柠檬酸的亚铁氰化钾混合溶液；

（2）将步骤（1）得到的含柠檬酸的亚铁氰化钾混合溶液逐滴加到含柠檬酸的三氯化铁混合溶液中，在60°C条件下剧烈搅拌，冷却到室温后继续搅拌半个小时，离心后用去离子水洗涤三次即可得到普鲁士蓝纳米颗粒PB；

（3）将从小鼠眼球中取出的小鼠全血用PBS洗涤数次，加入灭菌的二次水在四度冰箱溶血一个小时，离心洗涤得到纯的红细胞膜；

（4）将步骤（3）得到的红细胞膜超声后分别通过孔径尺寸为400纳米和200纳米的碳酸脂膜数次，即可得到红细胞膜囊泡RBC；

（5）将步骤（4）得到的红细胞膜囊泡分散在一定浓度的Ce6溶液中室温下缓和搅拌1小时，通过离心去除游离的Ce6，即可得到嵌有光敏剂Ce6的红细胞膜囊泡RBC/Ce6；

（6）将步骤（2）得到的普鲁士蓝纳米颗粒分散在步骤（5）得到的嵌有光敏剂Ce6的红细胞膜囊泡中，通过数次孔径尺寸为100纳米的碳酸脂膜，即可得到最终的光敏剂Ce6嵌入型红细胞膜包裹普鲁士蓝复合纳米颗粒PB@RBC/Ce6;

所述步骤（1）中的含柠檬酸的三氯化铁混合溶液中的柠檬酸的浓度为25mM以及三氯化铁的浓度为1.0mM；所述步骤（1）中的含柠檬酸的亚铁氰化钾混合溶液中的柠檬酸的浓度为25mM以及亚铁氰化钾的浓度为1.0mM;

所述步骤（5）中Ce6浓度为50-300μg/ml。

2.根据权利要求1所述的Ce6嵌入型红细胞膜包裹普鲁士蓝纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中的含柠檬酸的三氯化铁混合溶液和含柠檬酸的亚铁氰化钾混合溶液体积比为1:1。

3.根据权利要求1所述的Ce6嵌入型红细胞膜包裹普鲁士蓝纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中小鼠全血洗涤到上清液无色后进行溶血。

4.根据权利要求1所述的Ce6嵌入型红细胞膜包裹普鲁士蓝纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤（4）中红细胞膜超声后先后通过孔径尺寸400纳米和200纳米的碳酸脂膜分别不少于7次。

5.根据权利要求1所述的Ce6嵌入型红细胞膜包裹普鲁士蓝纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤（6）中普鲁士蓝纳米颗粒浓度为50-400μg/ml；所述步骤（6）中通过孔径尺寸100纳米的碳酸脂膜不少于七次。