[发明专利]四连接素模拟肽TNP及其应用

说明书

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及四连接素模拟肽TNP及其在治疗血管内皮细胞释放HMGB1引起疾病的药物中的应用。氮端进行了乙酰化的四连接素模拟肽的序列为Ac‑QPDGGKTENCAVLSGAANGKWFDKRCRDK‑biotin，乙酰化的四连接素模拟肽TNP可有效地阻止TNP水解，延长其半衰期以提高药物的生物效能，TNP在用于制备治疗脓毒症等疾病的药物时，可以有效抑制血管内皮细胞释放HMGB1，减少细胞外HMGB1的浓度，来降低脓毒症小鼠死亡率，可几乎完全阻断肾缺血再灌注小鼠血浆中尿素氮和肌酐的变化，减少缺血后肾小管坏死，达到治疗急性肾损伤的目的，为人类因血管内皮细胞释放HMGB1引起疾病的诊断与治疗提供了新的途径。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，涉及一种四连接素模拟肽TNP及其应用，具体涉及一种四连接素模拟肽TNP及其在制备治疗血管内皮细胞释放HMGB1引起疾病的药物中的应用。

背景技术

脓毒症是感染触发的宿主反应所引起的多器官功能衰竭。全球每年有约三千万患者,病死率达20-70%。因此在2017年被世界卫生大会确定为人类健康的重大威胁。

急性肾损伤（acute kidney injury，AKI）是指患者血清中的肌酐水平在48小时内增加到0.3毫克/100毫升或者在7天内增加50%。AKI是住院患者，尤其是重症病房的常见病，病死率约18.9-46.5%。AKI有感染性和非感染性的原发病因，其中肾缺血是最常见的非感染性病因，而脓毒症（感染引起的器官功能障碍）是最常见的感染性病因。

过度炎症反应是造成脓毒症和急性肾损伤的重要机制。细胞外高迁移率族蛋白B1（high mobility group box 1，HMGB1）作为一个促炎症因子在脓毒症和AKI等疾病的发病过程中起重要作用。HMGB1在生理状态下主要存在于细胞核内，但细胞在受到感染或炎症过程的生物因子刺激后可能主动向细胞外释放HMGB1。另外，受损伤或者坏死的细胞由于细胞结构的解体会被动释放HMGB1。所以，主动或者被动释放都将导致细胞外HMGB1水平的提高。

在体内绝大多数组织存在的血管内皮细胞在炎症过程中主动和/或被动释放HMGB1，并参与脓毒症、呼吸窘迫综合症、急性肾损伤、以及其它缺血性组织损伤、脉管炎、血管硬化和栓塞等疾病过程（Rauvala H and Rouhiainen A. Physiological andpathophysiological outcomes of the interactions of HMGB1 with cell surfacereceptors. Biochim. Biophys. Acta .2010 Jan-Feb ;1799(1-2) 164-170）。因此，抑制血管内皮细胞释放降低细胞外HMGB1的水平可以降低脓毒症小鼠模型的死亡率和减少这些疾病过程中的组织损伤。

四连接素（tetranectin，TN）在三十年前被报道是纤溶酶原结合蛋白，为三叠体结构，由三条完全相同的多肽链通过非共价键连接而成。TN存在于多种组织和细胞中，已报道其与多种疾病相关，如肿瘤、外周非肿瘤疾病、中枢神经系统疾病等，但是，至目前为止，TN的功能及作用机制扔不清楚，尤其是在脓毒症或急性肾损伤病理过程中的作用尚未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种四连接素模拟肽TNP，对其序列的氮端和/或碳端分别进行化学修饰，可减缓模拟肽在体内的降解，延长其半衰期，提高其生物效能。

本发明的另一目的是提供一种四连接素模拟肽TNP在制备治疗血管内皮细胞释放HMGB1引起疾病的药物中的应用。

本发明研究内容受到中国国家自然科学基金（批准号：81671959），中国国家自然科学基金委员会-河南省人民政府联合基金（批准号：U1704171）和河南大学人才特区特聘教授启动经费的支持。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：