[发明专利]一种使用毛细管电泳-质谱联用检测独脚金内酯类似物的方法

说明书

本发明提供一种使用毛细管电泳‑质谱联用检测独脚金内酯类似物的方法，所述方法为将独脚金内酯类似物溶液在毛细管电泳‑质谱联用仪中上样检测，其特征为：(1)采用5‑15kV的电压在毛细管电泳‑质谱联用仪中电泳，选用75μm内径的色谱柱，采用乙酸铵溶液作为缓冲液，添加乙酸铵的50％甲醇作为鞘流液；(2)使用Chemstation对色谱图进行分析，得到色谱峰；(3)使用Data Analysis对质谱图进行分析，得到质谱图，通过该图分析子离子信息。所述方法可以高效的检测独脚金内酯类似物，且色谱峰型良好，出峰速度快，所述方法具有样品用量小、操作便捷、检测时间短、价格低廉、样品无需衍生化等优点。

技术领域

本发明涉及独脚金内酯类似物的检测方法，具体为采用毛细管电泳-质谱联用法检测独脚金内酯类似物的方法。

背景技术

独脚金内酯(Strigolactones)是近年来发现的一种新型植物激素，作为一种产生于植物根部的类胡萝卜素衍生物，被称作第七种植物激素。它能够与生长素和细胞分裂素协同抑制植物的分枝和侧芽的生长、诱导丛枝真菌菌丝分枝、促进植物和土壤微生物的共生作用。另外，在植物与其寄生植物相互作用的过程中，独脚金内酯还起到信号分子的作用，它可以诱导寄生植物如独脚金属、列当属种子的萌发。

独脚金内酯具有非常广泛的应用前景，然而很难从植物中提取大量天然的独脚金内酯，人们从而转向通过化学合成的方法得到人工独脚金内酯。其中以GR24最为出名，是首个最为有效的人工合成独脚金内酯类似物，结构式如下图。其能够促进多种根寄生植物种子萌芽，也可以调控植物的分枝，还具有调控丛枝真菌菌丝分枝，调控小立碗藓扩张等功能。其生物活性原理已经被证实与独脚金内酯相同，是通过调控植物的生长素合成的方式来控制植物发育。

早期检测独脚金内酯类似物GR24的技术是以气相色谱-质谱联用为主，然而由于独脚金内酯自身的化学特性不稳定，在气相前处理衍生化的过程中容易损失掉大量成分，导致检测精度下降。目前科学界常用的检测手段是利用高效液相色谱-质谱联用法，该方法对比传统的气质联用法，样品无须经过前处理，对于受热易分解的样品比较适合，应用范围更广，但是存在样品用量大、检测耗时、单针检测昂贵等缺点。

因此需要一种精度高、快速、且成本低的独脚金内酯类似物的检测方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种使用毛细管电泳-质谱法检测独脚金内酯类似物的方法。

本发明采用了如下技术方案：

一种使用毛细管电泳-质谱联用检测独脚金内酯类似物的方法，所述方法为将独脚金内酯类似物溶液在毛细管电泳-质谱联用仪中上样检测，其特征为所述方法：

(1)采用5-15kV的电压在毛细管电泳-质谱联用仪中进行电泳，选用75μm内径的色谱柱，采用乙酸铵溶液作为缓冲液，使用添加乙酸铵的50％甲醇作为鞘流液；

(2)使用Chemstation对色谱图进行分析，得到所述独脚金内酯类似物色谱峰；

(3)使用Data Analysis对质谱图进行分析，得到所述独脚金内酯类似物质谱图和所述独脚金内酯类似物的子离子信息。

进一步的，所述步骤(1)中采用20mmol乙酸铵溶液作为缓冲液。

进一步的，所述步骤(1)中选用75μm内径未涂层熔融石英毛细管作为色谱柱。

进一步的，所述步骤(1)中使用50％甲醇加入1％乙酸铵作为鞘流液。

进一步的，所述步骤(1)选用8kV作为分离电压。

优选的，一种使用毛细管电泳-质谱联用检测独脚金内酯类似物的方法，所述方法的特征为：