[发明专利]制备NRX-1074的方法

说明书

本发明涉及一种抗抑郁多肽药物NRX‑1074的制备方法，包括以下步骤：1)(R)‑(‑)‑2‑苄基脯氨酸酯与氨基保护的脯氨酸发生缩合反应生成式II所示化合物；2)脱去氨基保护基；3)分别向N端和/或C端延长肽链，得到目标化合物NRX‑1074。该方法缩合效率显著提高，整体收率高，适合放大量合成。

技术领域

本发明涉及多肽的制备方法，特别是一种抗抑郁多肽药物NRX-1074的制备方法。

背景技术

GLYX-13(Thr-Pro-Pro-Thr-NH₂，SEQ ID NO.1)是Naurex公司研发的一种速效抗抑郁药，目前正在进行临床III期研究。GLYX-13是一个四肽序列，为N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体部分激动剂，特异性地作用于受体的甘氨酸位点，从而选择性调节N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体功能。这种独特的作用机制，使其具备与氯胺酮类似的快速抗抑郁作用，同时避免了氯胺酮致幻及精神分裂症样的副作用。

NRX-1074(Thr-Pro-Pro(Benzyl)-Thr-NH₂，SEQ ID NO.2)是由GLYX-13衍生的第二代速效抗抑郁药物，在结构上，NRX-1074与GLYX-13的明显区别在于C端第2位的脯氨酸变为苄基取代的非天然氨基酸。临床研究表明NRX-1074同样显示出速效抗抑郁效果，且疗效较GLYX-13更为突出。并且，由于非天然氨基酸的引入，使得该药物的口服生物利用度得到了明显的改善，可以口服给药，而GLYX-13只能通过静脉给药。

尽管GLYX-13和NRX-1074的结构类似，但二者的合成方法显著不同。GLYX-13均由天然氨基酸构成，可以方便地应用固相和液相的方式合成；而NRX-1074由于非天然氨基酸苄基脯氨酸位阻较大，合成FMOC保护产物困难，因此不适合应用固相方法合成；同样由于非天然氨基酸的影响，液相方法的合成顺序对于收率影响很大。

文献报道的一种方法是以Cbz-Pro-OEt为起始原料，与溴化苄反应生成外消旋体保护脯氨酸，再分别与保护的苏氨酸、脯氨酸、苏氨酸顺序反应，生成外消旋体四肽产物Thr-Pro-Pro(Benzyl)-Thr-OCH₃。该四肽通过制备型HPLC分离纯化后再与氨的甲醇溶液反应得外消旋体四肽Thr-Pro-Pro(Benzyl)-Thr-NH₂，最后再经手性制备型HPLC分离纯化得光学纯目标化合物。这种方法合成路线长，总收率很低，而且需要经过两次高效液相色谱分离纯化，成本高，不适合大量合成。

液相方法合成四肽NRX-1074，可以有多种合成顺序，包括：从C端到N端逐个延长肽链；从N端到C端逐个延长肽链；片段缩合(2+2，1+3，3+1)，等等。发明人经过研究发现，由于(R)-2-苄基脯氨酸的空间位阻较大，从N端到C端逐个延长肽链或者从C端到N端逐个延长肽链的方法，与(R)-2-苄基脯氨酸缩合的步骤，反应困难，收率极低；基于同样的原因，片段缩合的方法收率也很低。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种收率高和/或适合放大量的制备NRX-1074的方法。本发明的另一个目的是提供一种适合放大量的制备NRX-1074的方法。

本发明涉及一种制备NRX-1074或其药学上可接受的盐的方法，包括以下步骤：

1)式I所示(R)-(-)-2-苄基脯氨酸酯与式i所示的氨基保护的脯氨酸或式ii所示的氨基保护的脯氨酸酰氯发生缩合反应生成式II所示化合物；

2)脱去式II中的保护基R₁，得到式III所示化合物；

3)分别向N端和/或C端延长肽链，得到目标化合物NRX-1074，

其中：