[发明专利]一种防止羊肚菌菌种退化的保藏培养基及保藏方法

权利要求书

1.一种防止羊肚菌菌种退化的保藏培养基，其特征在于，1L所述保藏培养基的配方如下：蔗糖12g、硫酸铵6.0～6.2g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5～0.6g、琼脂18～20g、蒸馏水1000mL，自然pH。

2.根据权利要求1所述的防止羊肚菌菌种退化的保藏培养基，其特征在于，1L所述保藏培养基的配方如下：蔗糖12g、硫酸铵6.2g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g、琼脂18g、蒸馏水1000mL，自然pH。

3.一种利用权利要求1所述的保藏培养基防止羊肚菌菌种退化的保藏方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)按照以下方法培养得到菌块：

将待保藏的菌丝转接于装有权利要求1保藏培养基的试管斜面中，待菌丝长满斜面后，得到菌块；

(2)将菌块进行保藏，保藏方法为石蜡油保藏法、超低温保藏法或者生理盐水保藏法；

其中，超低温保藏法如下：将配制好的体积分数30％无菌甘油溶液作为保护液，加入冻存管中，向冻存管加入含有菌丝的菌块，并使无菌甘油溶液完全浸没菌块，放置于-80℃进行保藏；在-80℃保藏一天后，取冻存管进行检验，选择存活的菌种继续-80℃长期保藏。

4.根据权利要求3所述的保藏方法，其特征在于，体积分数30％无菌甘油按照以下方式制备：量取30mL甘油加入蒸馏水，定容至100mL，121℃高压灭菌30min。

5.根据权利要求3所述的保藏方法，其特征在于，石蜡油保藏法如下：向菌丝长满斜面的试管中注入灭菌的液体石蜡，使其覆盖整个斜面，然后直立放于4～6℃中进行保藏。

6.根据权利要求3所述的保藏方法，其特征在于，生理盐水保藏法如下：以权利要求1中不添加琼脂的保藏培养基作为菌丝体的液体保藏培养基；取氯化钠0.7～0.9克，溶入100毫升蒸馏水中，121℃高压灭菌30min后得到无菌生理盐水，备用；将待保藏的菌种接入液体保藏培养基中室温220r/min振荡培养5～7天；然后将培养的菌液注入灭菌后装有生理盐水的冻存管中，用石蜡涂封冻存管盖，4℃保藏。