[发明专利]一种高效液相色谱-质谱法测定棉花中褪黑素的方法

权利要求书

1.一种高效液相色谱-质谱法测定棉花中褪黑素的方法，其特征在于，包括：将棉花样品加液氮研磨成粉末，然后与提取溶剂混合，经超声提取后，以高效液相色谱-质谱法检测，采用外标法对褪黑素进行定量；

超声提取的条件为超声功率200-300W，超声时间30min；

高效液相色谱-质谱法检测的色谱条件为：采用C18柱；流动相由A相和B相组成，A相为0.1％甲酸水溶液，B相为甲醇；采用梯度洗脱；所述梯度洗脱的程序为：0-0.2min，A相＝90％；0.2-3min，A相递减至0％；3-6min，A相＝0％；6-8.1min，A相递增至90％；6.1-10min，A相＝90％；

高效液相色谱-质谱法检测的质谱条件为：喷雾电压：3500V，鞘气：35Arb，辅助气：10Arb，雾化温度：275℃，离子传输管温度：325℃，检测离子：母离子为m/z233.152，子离子为m/z174.000、159.000和130.071。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述提取溶剂为甲醇。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，棉花样品与提取溶剂加入量的比为1g:10ml。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超声提取与高效液相色谱-质谱法检测之间还包括：以8000r/min离心10min，取上清液并用氮气吹干，将吹干的残余物质溶于5％甲醇水溶液制成备用溶液的步骤，以及采用甲醇和水激活C18柱，将备用溶液加进C18柱中，待完全流出后用5％甲醇水溶液冲洗C18柱，再用80％甲醇水溶液将吸附在C18柱中的褪黑素洗脱出来并过滤的步骤。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，外标法对褪黑素进行定量的标准曲线为：Y＝1.94458×10⁷+5.0306×10⁷X；其中，Y代表峰面积，X代表褪黑素浓度。