[发明专利]一种自免肝抗体的多项检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种自免肝抗体的多项检测试剂盒，包括：分别装有复合微珠悬浮液、荧光标记物、样本稀释液、洗涤液的多个密封试剂瓶，分隔并集中包装这些试剂瓶的试剂盒；微珠是经不同的荧光染料染色并编码的聚苯乙烯微球；复合微珠悬浮液中包含检测微珠、标准微珠、参考微珠和空白微珠，检测微珠是在不同编码的微珠表面分别包被不同的自身免疫性肝病抗原；标准微珠包含至少三种结合了不同浓度梯度人IgG的微珠；参考微珠是结合了抗人IgG的微珠；空白微珠是未加入任何抗原的微珠。本发明可同时对一份人血清样本做多个自免肝抗体的检测，为自身免疫性肝病患者提供了一个有效的实验室检测手段，对诊断以及进一步治疗具有重要意义。

技术领域

本发明涉及自身免疫性肝病抗体的检测领域，具体涉及可一次性检测多项自免肝抗体的试剂盒。

背景技术

通常情况下，人不会产生自身抗体。免疫系统的主要功能是区分外来抗原(如感染性的抗原)和自身组织。当一个人的免疫系统产生对自身抗原有潜在破坏性的抗体(即自身抗体)时就会发生免疫混乱。大多数的自身免疫混乱可以分为非器官特异性(系统性)或器官特异性的。

自身免疫性肝病作为一种发病机理不明的疾病与许多疾病有关联，且由于最初的临床症状与病毒性肝炎症状相似，临床上诊断比较困难。因此，准确及时地监测出自身免疫性肝病的特异性自身抗体无疑对诊断以及进一步治疗具有重要意义。

自身免疫性肝病抗体包括抗Ro-52(SSA 52kDa),线粒体(AMA)、anti-CENP B、AMA-M2、Actin、LKM-1、Sp100、gp210、Nup62、PML、LC-1和SAL/LP)等多种不同抗原的免疫球蛋白IgG类抗体。

Ro-52抗体(Ro-52)抗Ro52抗体不具有疾病特异性，可在肌炎、系统性硬化症、其他胶原病、新生儿红斑狼疮、原发性胆汁性肝硬化、自身免疫性肝炎及病毒性肝炎中检出该抗体。

抗线粒体抗体-M2：AMA-M2是原发性胆汁性肝硬化(PBC)最为灵敏、特异的诊断标志。高滴度AMA-M2抗体对于PBC的诊断和预测PBC患者是否会出现肝功能障碍或者胆汁淤积症状意义重大。自身免疫性肝炎、进行性系统性硬化症、干燥综合征、与PBC重叠征患者中也可检测到AMA-M2抗体。慢性HCV、系统性红斑狼疮可检测到低浓度AMA-M2抗体。

早幼粒细胞蛋白抗体(PML)PML抗体主要出现在Sp100抗体阳性的患者中。两者具有相同的敏感性、特异性。出现PML抗体阳性与Sp100抗体阳性的PBC患者病情进展较快预后较差。PML与Sp100具有高度特异性提高了PBC患者的检出率，是PBC早期诊断的重要指标。

核颗粒蛋白抗体(Sp100)有少部分PBC及自身免疫性肝炎(AIH)患者中可检测到Sp100抗体。

抗gp210抗体(gp210)抗gp210抗体对PBC具有较高的敏感性和高度的特异性，与Sp100、AMA-M2联合检测可以提高PBC患者的检出率并增加对PBC诊断的特异性。gp210、Sp100对PBC诊断尤其对AMA-M2阴性的患者具有重要意义。

肝肾微粒体抗体(LKM-1)抗肝肾微粒体抗体-1是II型AIH的标志性抗体,在诊断及其鉴别诊断中起着非常重要的作用。分子生物学技术的发展为鉴定自身免疫性疾病的自身靶抗原提供了非常有用的实验手段。除了II型自身免疫性肝炎外,少数丙型肝炎患者血清中也可出现LKM-1。LKM-1可在1％的成人AIH患者中被检出，但在儿童AIH患者中LKM-1阳性率更高。在1-2％HCV患者中LKM-1也可以被检出。

肝溶质抗体(LC-1)LC-1对AIH的诊断具有一定的敏感性与100％的特异性，与SLA/LP一同检测可以提高AIH患者检出率。⑼可溶性肝-肝胰抗体(SLA/LP)SLA/LP在AIH患者中的阳性率为30％，但其特异性为100％，如果存在相应临床症状，仅SLA/LP就基本可以确诊AIH。