[发明专利]处理液组合物、试剂盒和生物器官透明化同时进行免疫标记的方法

权利要求书

1.一种处理液组合物，包含：

透明化处理液；和

荧光标记抗体，所述荧光标记抗体与所述透明化处理液的体积比为1:10至1:500，

其中，所述透明化处理液包含：

糖类；

尿素；

非离子表面活性剂，所述非离子表面活性剂为体积比为5:3至1:5的曲拉通和吐温混合物，

其中每100 ml所述透明化处理液包含：20-30 g的尿素，10-15 ml的非离子表面活性剂，40-60 g的糖类。

2.根据权利要求1所述的处理液组合物，其中所述糖类为果糖或蔗糖中的至少一种；所述曲拉通包括曲拉通X-100或曲拉通X-114；所述吐温包括吐温20，吐温40或吐温60。

3.根据权利要求1所述的处理液组合物，其中每100 ml所述透明化处理液还包含0-20ml的氨类和0-2 ml的抗氧化剂，并且余量为水。

4.根据权利要求1所述的处理液组合物，其中所述透明化处理液中随着糖类含量的增加，尿素含量也增加，或者随着糖类含量的减少，尿素含量也减少。

5.根据权利要求1所述的处理液组合物，其中抗体包括以下抗体中的至少一种：

抗甲胎蛋白抗体，分子量约65 kD，使用浓度范围为5-25 µg/ml；

抗生存素抗体，分子量约16 kD，使用浓度范围为5-25 µg/ml；和

抗绿色荧光蛋白抗体，分子量约27 kD，使用浓度范围为10-100 ug/ml。

6.一种处理液试剂盒，包含：

第一部分，包括：透明化处理液和按1:10至1:500体积比与透明化处理液混合的一抗；和

第二部分，包括：透明化处理液和按1:10至1:500体积比与透明化处理液混合的带荧光标记的二抗，

其中所述透明化处理液为权利要求1-4任一项中所述的透明化处理液。

7.根据权利要求6所述的处理液试剂盒，其中所述的一抗包括：

抗哺乳动物雷帕霉素靶蛋白抗体，兔源，分子量约289 kD，使用浓度范围为10-50 µg/ml；

抗β-Ⅲ型微管蛋白抗体，小鼠来源，分子量约55 kD，使用浓度范围为10-50 µg/ml；

抗神经元特异性核蛋白抗体，兔源，分子量约34 kD，使用浓度范围为10-200 µg/ml；或

抗Ⅱ型胶原蛋白抗体，分子量约142 kD，小鼠来源，使用浓度范围为10-200 µg/ml，

所述的带荧光标记的二抗是能够与一抗特异性结合的免疫球蛋白，其携带荧光标记。

8.一种生物器官透明化同时进行免疫标记的方法，包括用权利要求1-5中任一项所述的处理液组合物浸泡生物组织器官。

9.根据权利要求8所述的生物器官透明化同时进行免疫标记的方法，其中浸泡在37℃恒温进行1-7天。

10.根据权利要求8或9所述的生物器官透明化同时进行免疫标记的方法，其中所述生物组织器官包括脑、脊髓、关节软骨或脏器.

11.一种生物器官透明化同时进行免疫标记的方法，包括用根据权利要求6-7中任一项所述的处理液试剂盒处理生物组织器官，其中

先用第一部分浸泡生物组织器官，浸泡在37℃恒温进行1-4天；

然后，用第二部分浸泡生物组织器官，浸泡在37℃恒温进行1-3天。

12.根据权利要求11所述的生物器官透明化同时进行免疫标记的方法，其中所述生物组织器官包括脑、脊髓、关节软骨或脏器。