[发明专利]一种生物组织样本电镜制样专用固定液及其制备方法

说明书

本发明涉及电镜制样固定液制备技术领域，具体的讲涉及一种生物组织样本电镜制样专用固定液，包括以下成分组成：1.0‑3.0g多聚甲醛粉末；20.0‑30.0ml蒸馏水；1.0‑5.0ml1N氢氧化钠；3.0‑6.0ml 5％戊二醛；二甲砷酸缓冲液；22.0‑26.0mg无水氯化钙；其制备方法包括以下几个步骤：步骤一，取1.0‑3.0g多聚甲醛粉末溶于20.0‑30.0ml蒸馏水中，升温至65℃以下并不停搅拌；步骤二，在搅拌的同时加入1.0‑3.0ml 1N氢氧化钠，溶液透明后，冷却冷却后加入5％戊二醛3.0‑6.0ml；步骤三，在混合溶液中加入二甲砷酸缓冲液或磷酸缓冲液，使体积达到50ml；步骤四，最后加入22.0‑26.2ml无水氯化钙，调节混合液pH为6.8‑7.5即得产品固定液。

技术领域

本发明涉及电镜制样固定液制备技术领域，具体的讲涉及一种生物组织样本电镜制样专用固定液及其制备方法。

背景技术

随着精准医学的发展，观察和了解单一个细胞生理和病理状态下各种细胞器的超微形态结构，对基础医学研究和临床病理诊断具有重要意义。目前对动物细胞的结构观察中，光学显微镜和电子显微镜是必不可少的工具，光镜观察显示的结构图像，受限于其放大倍数，结构信息十分有限；透射电镜可观察细胞超微结构(隋淑光.用电镜半薄切片技术制备光镜连续观察样品的实验[J].生物学教学,2011,36(7):58.)。故而，透射电子显微镜是研究生物超微结构的重要工具。对于生物样品而言，专用固定液的制备对于生物组织样本电镜制样至关重要，常用的固定液对微管的保存不好，所以亟待制备一种对微管有良好的保存作用的专用固定液。

发明内容

因此本发明提出一种生物组织样本电镜制样专用固定液及其制备方法，用来解决常用的固定液对微管的保存不好的问题。

本发明的技术方案是这样实现的：一种生物组织样本电镜制样专用固定液，包括以下成分组成：1.0-3.0g多聚甲醛粉末；20.0-30.0ml蒸馏水；1.0-5.0ml 1N氢氧化钠；3.0-6.0ml 5％戊二醛；二甲砷酸缓冲液；22.0-26.0mg无水氯化钙。

进一步地，一种生物组织样本电镜制样专用固定液，包括以下成分组成：2.2-3.0g多聚甲醛粉末；22.2-26.8ml蒸馏水；1.0-3.8ml 1N氢氧化钠；3.0-6.0ml 5％戊二醛；二甲砷酸缓冲液；23.2-25.6mg无水氯化钙。

进一步地，所述二甲砷酸缓冲液为0.2M，pH为7.2-7.6。

进一步地，所述二甲砷酸缓冲液由二甲砷酸钠和盐酸混合制得。

一种生物组织样本电镜制样专用固定液的制备方法，包括以下几个步骤：

步骤一，取1.0-3.0g多聚甲醛粉末溶于20.0-30.0ml蒸馏水中，升温至65℃以下并不停搅拌；

步骤二，在搅拌的同时加入1.0-3.0ml 1N氢氧化钠，溶液透明后，冷却冷却后加入5％戊二醛3.2-6.6ml；

步骤三，在混合溶液中加入二甲砷酸缓冲液，使体积达到50ml；

步骤四，最后加入22.0-26.2mg无水氯化钙，调节混合液pH为6.8-7.5即得产品固定液。

进一步地，所述步骤三中二甲砷酸缓冲液的制备方法为：准备二甲砷酸钠4.0-5.2g，加入蒸馏水至100ml；0.2N 1-20ml盐酸，将二甲砷酸钠溶液与0.2N 1-20ml盐酸混合稀释成200ml，得到不同pH的二甲砷酸缓冲液。

通过上述公开内容，本发明的有益效果为：本发明采用二甲砷酸缓冲液制备的固定液比较稳定，不易生长细菌，可长期保存，与低浓度的钙质不发生沉淀反应。

具体实施方式