[发明专利]一种岩藻糖苷酶及其在制备孟买型红细胞中的应用在审
申请号: | 201810829927.4 | 申请日: | 2018-07-25 |
公开(公告)号: | CN110760492A | 公开(公告)日: | 2020-02-07 |
发明(设计)人: | 陈力;李天胜 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C12N9/24 | 分类号: | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/63;C12N5/078 |
代理公司: | 31268 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 吴桂琴 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 岩藻糖苷酶 细胞表面 红细胞 红细胞细胞 生物学技术 血型 多糖结构 工程领域 生物医药 酶活性 新途径 岩藻糖 有效地 抗原 供血 生物学 切除 转化 应用 发现 研究 | ||
1.一种岩藻糖苷酶,其特征在于,所述的岩藻糖苷酶的氨基酸序列为:
具有如SEQ ID NO 1所示的序列;以及与该序列具有30%同源性的各种具有酶活性的衍生序列。
2.一种编码岩藻糖苷酶的核酸,其特征在于,所述的序列如SEQ ID NO 1。
3.一种载体,其特征在于,所述的载体含有权利要求2所述的序列。
4.一种工程菌,其特征在于,所述工程菌含有权利要求2或3中的序列。
5.一种岩藻糖苷酶,其特征在于,所述的岩藻糖苷酶能够水解pNP-α-L-Fuc。
6.一种岩藻糖苷酶,其特征在于,所述的岩藻糖苷酶能够水解含有岩藻糖残基的寡糖。
7.一种酶解去除细胞表面岩藻糖的方法,其特征在于,所述的方法中使用权利要求1所述或其他岩藻糖苷酶。
8.一种岩藻糖苷酶,其特征在于,所述的岩藻糖苷酶能够水解细胞表面的岩藻糖。
9.如权利要求8所述的岩藻糖苷酶,其特征在于,所述的细胞是红细胞。
10.如权利要求8所述的岩藻糖苷酶,其特征在于,所述的细胞是人类红细胞。
11.权利要求1所述的岩藻糖苷酶在用于切除细胞表面岩藻糖的应用。
12.如权利要求11所述的应用,其特征在于,所述应用包括:孟买型红细胞及其它细胞的制备及应用。
13.权利要求1所述的岩藻糖苷酶的制备方法,其特征在于,该方法包括步骤:
1)获得并扩增权利要求1所述的岩藻糖苷酶的基因序列;
2)构建含有权利要求1所述的岩藻糖苷酶的基因序列的重组载体;
3)表达权利要求1所述的岩藻糖苷酶;
4)分离纯化并鉴定。
14.如权利要求13所述的方法,其特征在于,所述的表达的系统是细菌、酵母或者昆虫表达系统。
15.如权利要求13所述的方法,其特征在于,所述的方法包括常规的微生物发酵生产,利用生物工程技术在细菌、酵母、昆虫表达系统中的表达和生产。
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