[发明专利]AKAP4抗原检测的检测试剂、检测试剂盒及应用与检测方法

说明书

本发明提供了AKAP4抗原检测的检测试剂、检测试剂盒及应用与检测方法，属于生物医学检验领域。本发明提供的AKAP4抗原检测的检测试剂，检测试剂简单易得，方便配制；将检测试剂应用于制备AKAP4抗原检测的检测试剂盒，方便进行检测；AKAP4抗原检测的检测方法操作简单，步骤简略；易于操作；检测结果准确可靠，具有较好的实用性。

技术领域

本发明涉及生物医学检验领域，具体而言，涉及AKAP4抗原检测的检测试剂、检测试剂盒及应用与检测方法。

背景技术

流式细胞术可用于检测经过荧光标记的细胞、胚胎、RNA、DNA、蛋白质颗粒、微生物、病毒等生物微粒。检测中，流式细胞术需要借助于经过整形的激光光斑照射在位于液流中心的生物微粒上，生物微粒在激光光斑的激发下发出散射光和荧光。这些散射光和荧光信号被光电倍增管、光电二极管等光电转换器件收集，再经过检测系统分析，从而得出生物微粒的物理和化学信息，如细胞尺寸、表面粒度、抗原信息等。基于流式细胞术的检测原理，激光光斑的形状和质量是影响检测灵敏度、单个微粒分辨力的关键因素。

目前已有的测AKAP4抗原检测方法为酶联免疫吸附法，借助酶标仪得到的吸光度值来进一步计算其浓度。该方法操作复杂，每次检测需要通过梯度校准品建立校准曲线，不利于少量样本检测。并且检测结果准确性与校准品、酶标仪型号、精密度等关系密切。因此，急需开发一个简单、准确、易操作的检测方法。

发明内容

本发明的第一目的在于提供AKAP4抗原检测的检测试剂，该检测试剂方便用于AKAP4抗原检测。

本发明的第二目的在于提供上述的AKAP4抗原检测的检测试剂在制备AKAP4抗原检测的检测试剂盒中应用。

本发明的第三目的在于提供AKAP4抗原检测的检测试剂盒，方便于检测。

本发明的第四目的在于提供AKAP4抗原检测的检测方法，操作简单，快速易行。

为了实现本发明的上述目的，采用以下技术方案：

AKAP4抗原检测的检测试剂，检测试剂主要包括PBS样本洗涤液、样本固定液、羊抗人AKAP4的抗体，荧光素标记的抗羊的二抗。

上述的AKAP4抗原检测的检测试剂在制备AKAP4抗原检测的检测试剂盒中应用。

AKAP4抗原检测的检测试剂盒，检测试剂盒包括PBS样本洗涤液、样本固定液、羊抗人AKAP4的抗体，荧光素标记的抗羊的二抗，样本固定液为包括0.3％的多聚甲醛的PBS缓冲液。

AKAP4抗原检测的检测方法，检测方法包括以下步骤：

用PBS样本洗涤液洗涤细胞样本，加入1-3倍体积的样本固定液固定细胞样本，得到固定化样本，将固定化样本分成检测固定样本和对照固定样本；

在检测固定样本中加入1-100μL羊抗人AKAP4的抗体，得到待检混合样本；对照固定样本加入非特异的IgG，得到对照混合样本；

待检混合样本和对照混合样本分别进行第一孵育，然后分别用PBS样本洗涤液洗涤，加入荧光素标记的抗羊的二抗进行第二孵育，然后用PBS样本洗涤液；

通过流式细胞仪检测。

本发明的有益效果为：本发明提供的AKAP4抗原检测的检测试剂，检测试剂简单易得，方便配制；将检测试剂应用于制备AKAP4抗原检测的检测试剂盒，方便进行检测；AKAP4抗原检测的检测方法操作简单，步骤简略；易于操作；检测结果准确可靠，具有较好的实用性。

附图说明