[发明专利]一种真菌发酵液及其应用

说明书

一种真菌发酵液及其应用，属于应用微生物学领域。本发明使用的真菌菌株是层叠韧革菌（Stereum complicatum）YMF1.5060，菌株已于2018年3月23日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所；保藏号：CGMCC No.15370。该发酵液作为生防菌制剂在防治南方根结线虫（Meloidogyne incognita）中的应用。本发明的优点在于：层叠韧革菌（S.complicatum）YMF1.5060使用马铃薯葡萄糖培养基和综合马铃薯葡萄糖培养基培养所得发酵液活性好，48小时对南方根结线虫（M.incognita）的校正致死率分别为94.7%、95.1%，能够作为生防菌制剂在防治南方根结线虫（M.incognita）中应用。

技术领域

本发明涉及一种真菌层叠韧革菌（Stereum complicatum）YMF1.5060 发酵液及其应用，属于应用微生物学领域。

背景技术

植物线虫引起的病害已成为农业生产中的第二大类病害，每年给全世界造 成严重的经济损失。其防治以化学农药为主，随着长期使用各种化学农药所带来 的环境污染问题的日趋严重，部分化学杀线虫剂被禁用，因此利用线虫天敌对线 虫进行生物防治越来越受到重视。微生物由于易培养，生长周期短，因此利用微 生物及其代谢产物防治线虫受到人们的关注。南方根结线虫（Meloidogyne incognita）是危害最为严重的植物病原线虫之一，所引起的病害是一种极难防治 的土传性病害。真菌层叠韧革菌（S. complicatum）是担子菌门，伞菌纲，红菇目，韧革菌科，韧革菌属真菌。目前没有该种真菌杀线虫活性的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种真菌层叠韧革菌（S. complicatum）YMF1.5060 发酵液及其应用。

本发明是这样实现的：

1.本发明使用的真菌菌株是层叠韧革菌（S. complicatum）YMF1.5060，该菌株已于 2018 年 3 月 23 日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路 1 号院 3 号中国科学院微生物研究所；保藏号：CGMCCNo. 15370。

2.层叠韧革菌（S. complicatum）YMF1.5060发酵液的制备

培养基：马铃薯葡萄糖培养基、综合马铃薯葡萄糖培养基。培养基的组成和配制方法如下:

马铃薯葡萄糖培养基：马铃薯 200 g 切成小块加水煮沸半小时后，过滤取滤 液用自来水定容至 1 L，加入葡萄糖 20 g ，pH自然，121 ℃灭菌 20 分钟。

综合马铃薯葡萄糖培养基：马铃薯 200 g 切成小块加水煮沸半小时后，过滤取滤液用自来水定容至 1 L，加入葡萄糖 20 g 、KH2PO4 3.0 g 、MgSO4 1.5 、柠檬酸 0.1 g 、维生素 B1 10 mg, pH 自然，121 ℃ 灭菌 20 分钟。

用马铃薯葡萄糖培养基、综合马铃薯葡萄糖培养基，对层叠韧革菌（S. complicatum）YMF1.5060 进行液体摇床 150 rpm-180 rpm，25-28℃培养 14 天后，取部分发酵液，将其过滤，除去其中的绝大部分菌丝，然后用 2 mL 的离心管（8000 rpm，10 min）离心除去剩余菌丝或颗粒杂质，用移液枪吸取上清，将上清液收集于无菌小瓶中，4 ℃保存备用。