[发明专利]一种血栓靶向长循环缓释脂质体及其制备方法

权利要求书

1.一种血栓靶向长循环缓释脂质体，其特征在于：所述脂质体包括由溶栓药物、星型胆酸功能化聚乳酸、大豆磷脂和胆固醇所构成的载药缓释脂质体及在其表面交错覆盖的血小板膜和二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇；

所述溶栓药物为水溶性溶栓药物，具体为尿激酶或链激酶。

2.如权利要求1所述的一种血栓靶向长循环缓释脂质体，其特征在于：各组分的质量百分比为：溶栓药物2-10％、大豆磷脂45-65％、胆固醇10-25％、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2-10％、星型胆酸功能化聚乳酸5-15%、血小板膜1-5%。

3.一种血栓靶向长循环缓释脂质体的制备方法，其特征在于：该制备方法包括以下步骤：

（1）用逆相蒸发法制备载药长循环缓释脂质体混悬液：称取大豆磷脂、胆固醇和星型胆酸功能化聚乳酸，全部溶于氯仿和甲醇的混合溶剂中；然后将溶栓药物溶于巴比妥缓冲液中，加入至上述混合溶液中，混合振摇，水浴超声4～6 min，所得乳剂在旋转蒸发仪上减压旋转除去有机溶剂，探针式超声1 min；最后加入二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇溶液，在5～8 ℃水浴旋转孵化40～60 min，得到载药长循环缓释脂质体混悬液；

所述溶栓药物为水溶性溶栓药物，具体为尿激酶或链激酶；

（2）将步骤（1）的载药长循环脂质体混悬液于-80 ℃冷冻12 h冻结，再于冷冻干燥仪中冻干24～30 h，将冷冻干燥后的样品密封储存于-80 ℃冰箱中，备用；

所述冷冻干燥仪的条件为-50 ℃，20 Pa；

（3）提取血小板膜：①分离血小板：取全血，在室温下以300×g的离心力离心5 min，收集上清液，以同样的离心力离心5 min，得到的上清液是富含血小板的血浆，然后在2000×g的离心力下离心4 min，沉淀血小板，将其重新悬浮于水中，在-80℃下储存备用；②血小板膜的获得：将冷冻的纯化血小板试样在室温下解冻，以21000×g的离心力离心7 min，并将沉淀重新悬于水中，-80℃下重新冷冻，重复以上过程3次，将沉淀重新悬浮于水中，得到血小板膜；

（4）血小板膜对脂质体的修饰：将步骤（3）血小板膜与步骤（2）脂质体混合，使用超声波仪以42 kHz的频率和100 W的功率，通过间歇超声处理，每次超声60 s，间断30 s，循环3次，过微孔滤膜，高速离心，弃上清液，冷冻干燥，即得血栓靶向长循环缓释脂质体。

4.如权利要求3所述的一种血栓靶向长循环缓释脂质体的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中氯仿和甲醇的混合溶剂中，氯仿、甲醇的体积比1:4。