[发明专利]一种乳酸乳球菌抗菌肽、其制备方法及应用在审
| 申请号： | 201810839942.7 | 申请日： | 2018-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN108948160A | 公开（公告）日： | 2018-12-07 |
| 发明（设计）人： | 刘陈立;蒙海林;刘复荣;范锦戴;刘明珠;何敬愉;崔金明 | 申请（专利权）人： | 深圳先进技术研究院;广州中国科学院先进技术研究所 |
| 主分类号： | C07K14/195 | 分类号： | C07K14/195;C12N15/31;C12N15/63;A61K38/16;A61P31/04;A23K20/147;A23L3/3526 |
| 代理公司： | 广州容大专利代理事务所(普通合伙) 44326 | 代理人： | 刘新年 |
| 地址： | 518055 广东省深圳市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 抗菌肽 乳酸乳球菌 制备 金黄色葡萄球菌 基因工程技术 抗生素替代品 蜡样芽孢杆菌 氨基酸序列 核苷酸序列 广谱抑菌 耐酸耐碱 热稳定性 耐药菌 应用 | ||
1.一种乳酸乳球菌抗菌肽，其特征在于，所述抗菌肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的抗菌肽，其特征在于，所述抗菌肽的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示。
3.根据权利要求1所述的抗菌肽，其特征在于，所述抗菌肽的氨基酸序列的分子量为3475Da。
4.根据权利要求1-3任意一项所述的抗菌肽，其特征在于，所述抗菌肽来自于斑仔鱼回肠菌群。
5.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体含有至少一个拷贝的权利要求2所述的核苷酸序列。
6.一种重组的宿主细胞，其特征在于，所述重组的宿主细胞含有权利要求5所述的表达载体。
7.一种如权利要求1-3中任一项所述的抗菌肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)提取菌群宏基因组；
(2)根据抗菌肽nisin基因设计引物，以提取的菌群宏基因组为模板进行PCR扩增；
(3)将PCR产物纯化，并将该目的产物和载体分别进行NcoⅠ和HindⅢ双酶切，验证酶切成功后进行纯化；
(4)将酶切产物与质粒载体进行连接，构建分泌表达抗菌肽的重组质粒，导入宿主细胞，得到表达抗菌肽的表达工程菌；
(5)用(4)中的工程菌，表达制得权利要求1-3任意一项所述的抗菌肽。
8.一种如权利要求1-4中任一项所述的抗菌肽、如权利要求5所述的表达载体、如权利要求6所述的重组宿主细胞在制备动物饲料中的应用。
9.一种如权利要求1-4中任一项所述的抗菌肽、如权利要求5所述的表达载体、如权利要求6所述的重组宿主细胞在制备治疗药物中的应用。
10.一种如权利要求1-4中任一项所述的抗菌肽、如权利要求5所述的表达载体、如权利要求6所述的重组宿主细胞在食品加工及保藏中的应用。
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