[发明专利]与绵羊多羔相关的SNP分子标记及其应用有效

专利信息
申请号: 201810847316.2 申请日: 2018-07-27
公开(公告)号: CN108913787B 公开(公告)日: 2021-11-02
发明(设计)人: 胡文萍;储明星;董新龙;田志龙;汤继顺;刘秋月;狄冉;王翔宇;梁奔梦;郭晓飞;魏彩虹 申请(专利权)人: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
主分类号: C12Q1/6888 分类号: C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王文君;陈征
地址: 100193 北京市海淀区圆明园西路*** 国省代码: 北京;11
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要:
搜索关键词: 绵羊 相关 snp 分子 标记 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种特异性引物组合或含有所述特异性引物组合的试剂盒在绵羊分子辅助育种中的应用;所述育种为选育产羔数多的绵羊;所述特异性引物组合为:

上游引物F:

5’-ACGTTGGATGTCTCAGGAGAGGAGAGGCAG-3’;

下游引物R:

5’-ACGTTGGATGTCTGCAGAAGTGGTTCGAGC-3’;

延伸引物的核苷酸序列如下:

S1:5’-TGGCCCGCCGCTT-3’;

所述特异性引物组合或含有所述特异性引物组合的试剂盒用于检测与绵羊多羔相关的SNP分子标记;所述与绵羊多羔相关的SNP分子标记位于绵羊第15号染色体第856850bp处,该SNP分子标记的多态性为A/C。

2.一种特异性引物组合或含有所述特异性引物组合的试剂盒在鉴定绵羊多羔性状中的应用;所述特异性引物组合为:

上游引物F:

5’-ACGTTGGATGTCTCAGGAGAGGAGAGGCAG-3’;

下游引物R:

5’-ACGTTGGATGTCTGCAGAAGTGGTTCGAGC-3’;

延伸引物的核苷酸序列如下:

S1:5’-TGGCCCGCCGCTT-3’;

所述特异性引物组合或含有所述特异性引物组合的试剂盒用于检测与绵羊多羔相关的SNP分子标记;所述与绵羊多羔相关的SNP分子标记位于绵羊第15号染色体第856850bp处,该SNP分子标记的多态性为A/C。

3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于,包括以下步骤:

1)提取待测绵羊的基因组DNA;

2)以待测绵羊的基因组DNA为模板,利用上游引物F和下游引物R,进行PCR扩增反应;

3)用SAP酶对PCR扩增产物进行消化;

4)以消化后的PCR扩增产物为模板,利用延伸引物进行延伸反应;

5)分析延伸产物,从而对绵羊多羔性状进行判定。

4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,步骤2)中PCR扩增反应使用的反应体系以5μL计为:20-50ng/μL基因组DNA 1μL,10×PCR反应缓冲液0.5μL,25mmol/L MgCl2 0.4μL,25μmol/L dNTPs 0.1μL,PCR Primer mix 1μL,5U/μL Taq DNA聚合酶0.2μL,去离子水补齐至5μL;

PCR扩增反应的扩增程序为:95℃2min;95℃30s,56℃30s,72℃60s,45个循环;72℃5min。

5.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,步骤3)中对PCR扩增产物进行消化,使用的SAP酶消化体系以2μL计为:SAP Buffer0.17μL,SAP Enzyme 0.3μL,去离子水补齐至2μL;

反应条件为:37℃40min,85℃15min,25℃保存。

6.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,步骤4)中延伸反应的体系以2μL计为:iplex Buffer 0.2μL,Terminator mix 0.2μL,Extend primer mix 0.94μL,iplex Enzyme0.041μL,去离子水补齐至2μL;延伸反应的条件为:

(1)94℃30s;

(2)94℃5s,

(3)5个内部循环:52℃5s,80℃5s;

步骤(2)-(3)一共40个外部循环;72℃3min。

下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,未经中国农业科学院北京畜牧兽医研究所许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201810847316.2/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。

×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top