[发明专利]一种靶向治疗恶性淋巴瘤的载药纳米粒的制备方法

说明书

本发明公开了一种靶向治疗恶性淋巴瘤的载药纳米粒的制备方法。以两亲性具有良好生物相容性聚合物PEG‑PLGA为载体中心，在疏水段包载疏水性药物阿霉素（DOX），再通过化学反应将暴露在外端的羧基活化，键合上带有氨基的核酸适配体。本发明利用核酸适配体的靶向作用，将载药纳米粒迅速递送至肿瘤部位后，利用PEG‑PLGA纳米粒的缓释作用，缓慢释放药物，达到长效高效治疗恶性淋巴瘤的作用，减少化疗等普通疗法带来的副作用。

技术领域

本发明属于生物化学药物技术领域。涉及一种靶向治疗恶性淋巴瘤的载药纳米粒的制备方法。

背景技术

特异性核酸适配体(Aptamer)是一种由寡肽核苷酸组成的小分子配体(通常是20～50个碱基)，能与相应的靶标特异性结合。与抗体相比较，与以下优点：1.低分子量(8-25kDa)，更加迅速穿透组织，到达靶点位置；2.非免疫原性，不易被免疫系统识别；3.具有热稳定性；4.可大量合成与修饰；5.相对于抗体的制备成本而言，核酸适配体的制备成本要相对低很多。

CD30分子是恶性淋巴瘤的一个特异标志物，其广泛表达于霍杰金淋巴瘤和间变性大细胞淋巴瘤细胞表面，而在正常组织不表达，因此被作为一个理想的靶点来开发淋巴瘤靶向治疗药物。CD30特异性核酸适配体(aptamer)，用于CD30阳性的霍杰金淋巴瘤和间变性大细胞淋巴瘤诊断和靶向治疗。然而，由于aptamer易于被核酸酶降解以及被肾脏滤过，其在临床的应用受到了限制。

聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)是被美国FDA批准的医药用辅料，广泛使用于载体材料，具备良好的生物可降解性、生物相容性和适当的降解速率等特点。但其本身为疏水性化合物，单独使用具有局限性。而聚乙二醇(PEG)是使用最广泛的亲水性化合物，可为药物扩散提供一个稳定的扩散层，可以有效减缓药物从血液的清除速率，延长体内滞留时间，并减小RES摄取，提高药物的生物利用度和肿瘤靶向效率。聚乙二醇(PEG)和聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)由于具有良好的生物相容性和生物可降解性，已经被FDA批准应用于临床，其安全性和有效性已经被广泛认可。

阿霉素是一种广谱的抗肿瘤抗生素药物，使用广泛，对多种肿瘤都具有较好的疗效，但是由于其半衰期较短，对正常组织具有细胞毒性，容易引起肿瘤细胞的多药耐药性，所以临床使用还是有一定的局限性。

将疏水性的阿霉素包裹在疏水核里，作为纳米粒给药，能够有效降低网状内皮系统(RES)对其识别和吞噬，再通过键合具有靶向性的核酸适配体，能够实现在体内的主动靶向与被动靶向，而使药物能在肿瘤部位达到聚集和释放，提高药物治疗作用，降低对正常细胞的损伤。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种以双亲性聚合物为中心载体，以特异性核酸适配体为靶向分子的能够显著治疗恶性淋巴瘤的缓释抗肿瘤药物，其中抗肿瘤药物会包载在制成的纳米粒中。本发明的目的之二是通过酰胺键将纳米粒与特异型核酸适配体相结合，制备成具有靶向作用的纳米粒。

本发明技术方案如下。

一种靶向治疗恶性淋巴瘤的载药纳米粒的制备方法，以两亲性具有良好生物相容性聚合物PEG-PLGA为载体中心，在疏水段包载疏水性药物阿霉素(DOX)，再通过化学反应将暴露在外端的羧基活化，键合上带有氨基的核酸适配体，达到既可以靶向性达到肿瘤部位也可以在肿瘤部位有效释放药物杀伤肿瘤细胞的效果。减少直接使用阿霉素后对人体正常组织器官的损伤作用。

上述方法中，PEG-PLGA的分子链为一端疏水一端亲水，其结构式如下：

上述方法中，所述核酸适配体和纳米粒之间是通过氨基与羧基键合后形成酰胺键，在体内不易被体液分解，能够有效将载药纳米粒传送至肿瘤部位释放药物。