[发明专利]一种山樱花组培快繁方法

说明书

本发明公开了一种山樱花组培快繁方法，该方法对山樱花的组织培养各个步骤进行了充分的试验，通过试验摸索出了适合山樱花组培的最佳培养条件，建立了山樱花组培快繁体系，克服了传统的扦插、嫁接等繁殖方法需要大量的母株，还需花费大量人力、物力、财力、时间，且繁殖系数低，成苗慢的问题。其增殖系数大、生根率好，培养周期短，且成活率高。

技术领域

本发明涉及组织培养技术领域，具体涉及一种山樱花组培快繁方法。

背景技术

山樱花植株优美漂亮，叶片油亮，花朵鲜艳亮丽，是园林绿化中优秀的观花树种。广泛用于绿化道路、小区、公园、庭院、河提等等，绿化效果明显。传统的繁殖方法主要是利用扦插、嫁接等繁殖方法，但这些繁殖方法一方面需要大量的母株，另一方面还需花费大量人力、物力、财力、时间等，且繁殖系数低，成苗慢。随着樱花在城市和乡镇园林绿化建设中的广泛应用，需要大规模的苗木。因此，传统的繁殖方法已远远不能满足生产上的需要。生产上迫切需要探讨出一种外植体萌芽率高、增殖系数大、生根率好的山樱花快速繁殖技术，推动我国山樱花产业化发展。

随着现代生物技术的发展，人们利用植物细胞的全能性，在人工控制的环境中，可以利用植物的茎尖、茎段、叶片等外植体诱导成小植株，这就是植物组织培养技术。植物组培苗具有根系发达，生长健壮，抗性增强，管理粗放，降低生产成本等特点。组织培养技术不仅具有繁殖系数大、成苗周期短的优点，而且能够保持亲本优良遗传性状的稳定性，为山樱花快速繁殖和工业化生产提供了一条有效的途径。目前关于山樱花组织培养技术的报道还比较少，并且还不系统，有些报道本发明人还通过试验证实其增殖系数低，生根率低，较低的成活率严重制约了山樱花在城市绿化及园林建设中的应用，因此亟待建立一种系统全面的山樱花组织培养体系。

发明内容

本发明的目的在于提供一种山樱花组培快繁方法，该方法山樱花组织培养萌芽率高、增殖系数大、生根率好，培养周期短，且成活率高。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

一种山樱花组培快繁方法，所述方法包括如下步骤：

(1)外植体的选择：选择生长旺盛，无病虫害、新发出时间短的带休眠腋芽的嫩枝条为外植体材料；外皮绿色的最佳，取材时间阳光充足的上午最佳；尽可能挑选表皮为嫩绿色休眠腋芽形态明显的新枝条。当天采下的外植体材料当天必须进行消毒处理，否则存放的时间过长很容易导致腋芽诱导失败；

(2)外植体的消毒；

(3)启动培养：将经过消毒处理过的外植体茎段切成2～3cm的小段，并保证每小段上有1个休眠腋芽，用无菌刀片先将茎段上下端切口褐化的部分切去，迅速将腋芽茎段的芽向上接种到启动培养基上，接种完成后放于培养室中培养；所述启动培养基为：MS培养基+6-BA2～3mg/L+NAA 0.2～0.5mg/L+蔗糖30g/L+卡拉胶8g/L；培养条件为：温度25±2℃，光照时间为10h/d，光照强度为1500～2000Lx，湿度为60％-65％，PH值5.8；

(4)增殖培养：第一次增殖培养继续使用启动培养基，培养40d以后，将新萌发的侧芽嫩茎从外植体茎段上切下来接种到增殖培养基上；开始增殖后的低代数时期(第2轮到第5轮)选用1/2MS培养基或WPM培养基添加6-BA 1～2mg/L、NAA 0.05～0.2mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶8g/L；高代数增殖培养(第6轮以后)要改为MS培养基添加6-BA 1～1.5mg/L、NAA 0.1～0.2mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶8g/L最佳；增殖培养各阶段培养条件一致为：培养条件为：温度25±2℃，光照时间为12h/d，光照强度为2000～2500Lx，60％～65％，pH 5.8～6.2；