[发明专利]一种炮天雄均一多糖及其制备方法及应用在审
申请号: | 201810856115.9 | 申请日: | 2018-07-24 |
公开(公告)号: | CN110746512A | 公开(公告)日: | 2020-02-04 |
发明(设计)人: | 覃军;邓广海;罗明超;龚又明;陈文良;林华;胡黎;郑显辉;陈艳红 | 申请(专利权)人: | 广东省中医院 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61K31/715;A61P25/00;A61P39/06 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 510000 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 天雄 均一 制备 神经保护活性 制备抗氧化剂 葡萄糖 凝胶层析柱 分离纯化 离子交换 神经保护 树脂脱色 层析柱 粗多糖 甘露糖 还原力 抗氧化 鼠李糖 岩藻糖 自由基 得率 非糖 可用 去除 饮片 申请 应用 | ||
1.一种炮天雄均一多糖,其特征是:其分子量为1.41×105Da,并由鼠李糖、甘露糖、岩藻糖和葡萄糖组成。
2.一种如权利要求1所述的炮天雄均一多糖的制备方法,其特征是:所述的包括如下步骤:
步骤1:将干燥的炮天雄饮片用5~8倍量的乙醇加热冷凝回流2~3次进行脱脂,脱脂后得到药渣;
步骤2:将药渣用5~8倍量的水提2~3次,温度为80~100℃,每次1.5~2h,将水提液减压浓缩后,加入无水乙醇至含醇量达80~85%,静置18~24h,弃去上清液,收集沉淀,得到炮天雄粗多糖;
步骤3:将炮天雄粗多糖复溶后加胃蛋白酶至其含量为0.1~0.4%,于32~37℃下恒温水浴10~12h,去除沉淀,重复2~3次,收集上层溶液,浓缩,加入Sevage试剂,剧烈振荡20~30min,静置8~12h,收集上层多糖溶液,重复至紫外扫描无蛋白特征吸收峰时止;
步骤4:对上层多糖溶液浓缩后加4~6倍量95~100%乙醇,静置18~24h,收集沉淀,重复2~3次后进行冷冻干燥,得炮天雄粗多糖粉末;
步骤5:将炮天雄粗多糖粉末用蒸馏水完全溶解后经DEAE FAST FLOW离子层析柱分离,洗脱条件:流速为2~2.5ml/min,依次以水、0.05mol/L的氯化钠、0.1mol/L的氯化钠、0.2mol/L的氯化钠、0.3mol/L的氯化钠以及0.1mol/L的氢氧化钠进行洗脱;利用全自动收集器分梯度收集,每个溶液梯度洗脱2~3倍柱体积,收集25~30管,每管3~5ml,采用硫酸-苯酚法进行隔管跟踪检测,将收集到的炮天雄多糖溶液浓缩至一定体积后,用3500Da分子量的透析带进行透析;装透析带的烧杯每天换水3~5次,透析一周后,将透析带内多糖液离心,并将其进行冷冻干燥,得到初步纯化的炮天雄苓多糖;
步骤6:将收集的洗脱液浓缩后用Superdex G-200凝胶柱再分离,以蒸馏水按照流速0.15~0.2ml/min进行洗脱,利用全自动收集器收集,每管3~5ml,苯酚一硫酸法检测后,收集洗脱曲线中的主峰部分;
步骤7:将收集的洗脱曲线中的主峰部分的溶液浓缩后用3500Da的透析袋透析2d脱盐,最后将透析袋内的溶液进行浓缩冷冻干燥,得到炮天雄均一多糖。
3.如权利要求2所述的炮天雄均一多糖的制备方法,其特征是:所述的Sevage试剂中,氯仿与正丁醇的比例为5∶1。
4.如权利要求1所述的炮天雄均一多糖在制备抗氧化产品或在制备神经保护活性产品的应用。
5.如权利要求4所述的炮天雄均一多糖在制备抗氧化产品或在制备神经保护活性产品的应用,其特征是:取羟丙甲纤维素、羧甲淀粉钠、微晶纤维素、乳糖、药用淀粉、硬脂镁与炮天雄均一多糖混合搅拌制成片剂。
6.如权利要求4所述的炮天雄均一多糖在制备抗氧化产品或在制备神经保护活性产品的应用,其特征是:取微晶纤维素、药用淀粉与炮天雄均一多糖混合搅排制成片剂。
7.如权利要求4所述的炮天雄均一多糖在制备抗氧化产品或在制备神经保护活性产品的应用,其特征是:取微晶纤维素、药用淀粉与炮天雄均一多糖混合搅拌,填入硬胶囊中,制成胶囊剂。
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