[发明专利]一种临床用脂肪干细胞的分离方法

说明书

本发明公开了一种用于破碎脂肪组织的装置，所述装置包括两个不少于两个注射器和连接管，注射器通过乳头与连接管联通，连接管具有不少于一个弯折结构，连接管最小内径3mm。利用本发明提供的装置将脂肪组织破碎后，可以大幅度的缩减消化脂肪干细胞的时间和胶原酶的用量，仅需要20分钟就可以达到很好的消化效果，同时获得的干细胞的数量是传统方法的4倍以上；同时多次离心有效的去除了消化用的胶原酶，保证了分离到的脂肪干细胞的安全性，有很大的推广应用的价值和潜力。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，更具体地，涉及一种临床用脂肪干细胞的分离方法。

背景技术

脂肪间充质干细胞起源于中胚层，具有成脂、成骨、成软骨、神经元等多能分化潜能，较骨髓间充质干细胞而言，在体内具有来源充足、取材方便、对人体创伤小等优点，在体外具有分离简单、增殖迅速、生物学稳定等特性，引起了众多研究者的兴趣和广泛关注，目前脂肪间充质干细胞已经运用到外胚层和内胚层的组织和器官，如视黄醇色素上皮细胞、肾管状上皮细胞、肝细胞、胰岛样细胞。

虽然，目前脂肪干细胞的制备方法众多，但是，难以统一脂肪干细胞的制备方法，而传统脂肪干细胞制备过程复杂，并且制备中所采用的试剂难以保证其临床安全性，限制其在临床中使用。而传统制备脂肪干细胞需要贴壁培养及提纯，耗时约1月左右，无疑增加患者手术次数，增加患者痛苦及经济负担。为此亟需一种可临床用的脂肪干细胞制备方法。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种用于破碎脂肪组织的装置，及其利用该装置的破碎脂肪组织和提取脂肪干细胞的方法。

本发明的第一个目的是提供一种用于破碎脂肪组织的装置。

本发明的第二个目的是提供利用所述装置破碎脂肪组织的方法。

本发明的第三个目的是提供一种分离脂肪干细胞的方法。

为了实现上述目的，本发明是通过以下技术方案予以实现的：

一种用于破碎脂肪组织的装置，其特征在于，所述装置包括不少于两个注射器和连接管，注射器通过乳头与连接管联通，连接管具有不少于一个弯折结构，连接管最小内径3mm。

优选地，连接管内径3～5mm。

优选地，所述装置包括两个注射器，连接管具有一个弯折结构。

优选地，弯折结构的弯折角度为60～120°。

更优选地，弯折结构的弯折角度为90°。

利用所述装置破碎脂肪组织的方法，在其中一个注射器中放置待破碎脂肪组织，轮流推注或抽拉两个注射器。

优选地，当所述装置中具有一个弯折结构，弯折结构的弯折角度为60～120°时，推注/抽拉速度1～3ml/s，轮流推注或抽拉10～25次。

优选地，弯折结构的弯折角度为90°时，推注/抽拉速度1ml/s，来轮流推注或抽拉10次。

注射器推注并抽拉恢复原位为一次。

一种分离脂肪干细胞的方法，包括以下步骤：

S1. 采集脂肪组织；

S2. 在无菌环境条件下，用含有广谱抗菌药物的晶体液冲洗脂肪组织1～2次，离心，保留上层油脂；

S3. 利用所述方法对步骤S2得到的油脂进行破碎，得到破碎后的脂肪组织；

S4. 将S3破碎后的脂肪组织加入胶原酶溶液，震荡，进行消化，得到消化后的脂肪组织；

S5. 向S4消化后的脂肪组织加入晶体液，离心，保留底部细胞；