[发明专利]一种TPGS修饰的锂皂石纳米颗粒的制备方法

说明书

本发明公开了一种TPGS修饰的锂皂石纳米颗粒的制备方法及其制备的TPGS修饰的锂皂石纳米颗粒在肿瘤化疗及抗肿瘤多药耐药材料中的应用。所述制备方法为：将锂皂石分散在超纯水中，逐滴加入硅烷偶联剂，搅拌反应，冷却，透析，得到氨基化锂皂石LM‑NH₂；将TPGS溶解在溶剂中，加入CDI活化，滴加到氨基化锂皂石LM‑NH₂的水溶液中反应，透析，得到TPGS修饰的锂皂石纳米颗粒LM‑TPGS；将阿霉素水溶液滴加入到TPGS修饰的锂皂石纳米颗粒LM‑TPGS的水溶液中，避光反应，离心洗涤，得到LM‑TPGS/DOX。本发明方法简单，制备的纳米颗粒能应用于抑制耐药细胞的增殖，具有产业化和商业化潜能。

技术领域

本发明属于纳米载药材料及其制备和应用领域，特别涉及一种TPGS修饰的锂皂石纳米颗粒的制备方法及其在抗肿瘤多药耐药方面的应用。

背景技术

化学药物治疗作为癌症治疗的重要手段之一，长期以来一直受到高度关注。然而，许多抗肿瘤药物存在临床疗效低下、毒副作用大等问题，而肿瘤多药耐药性(Mutidrugresisitance，MDR)是肿瘤化疗失败的最主要原因，在临床治疗中，化疗药物在杀死癌细胞的同时，经常伴随着MDR的发生。MDR现象是指肿瘤细胞在一个抗癌药物刺激下产生的对多种药物的耐受性，是癌细胞被药物刺激后产生的自我保护行为。P糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)介导的药物外排现象的增加是最重要的肿瘤多药耐药性的机制。很多临床上经常使用的抗癌药物，比如紫衫醇、阿霉素等都是P-gp作用底物。至今已有大量文献报道多种抑制MDR 方法被临床应用或纳入试验阶段：多种药物联合治疗，改善给药方法，开发新型的抗癌药物，使用P-gp抑制剂TPGS，基因沉默治疗等。然而这些方法总是存在缺陷，例如副作用大，效果差，价格昂贵等，临床治疗结果都不如人意。因此亟需一种新型的治疗耐药性肿瘤以及避免耐药性产生的治疗策略。而纳米载药是利用纳米材料作为载体将药物有效的输送到病灶内的一种新兴的治疗策略，具有避免游离药物在未到达肿瘤区域释放而失去药效等优点。

作为一种层状无机纳米材料锂皂石LAP，具有良好的胶体稳定性和生物相容性，可以在其层间包裹抗癌药物DOX。TPGS是一种能够破坏癌细胞线粒体功能从而抑制细胞内ATP产生的P-gp抑制剂。在LAP表面修饰TPGS，将有望提高药物在耐药细胞中的富集、增强化疗效果、实现逆转肿瘤MDR的效果。

检索国内外文献，尚没有发现关于一种聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯 (TPGS)修饰的锂皂石纳米颗粒的制备方法的相关报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供一种TPGS修饰的锂皂石纳米颗粒的制备方法，该方法工艺简单，反应条件温和易于操作，成本较低；制备的 LM-TPGS/DOX纳米颗粒具有良好的缓释效果与PH响应性释放特性，对 MCF-7/ADR细胞(耐DOX的人乳腺癌细胞)的增殖具有明显的抑制效果，可用于耐药细胞的有效治疗。

为了解决上述问题，本发明提供了一种TPGS修饰的锂皂石纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1)：将锂皂石分散在超纯水中，逐滴加入硅烷偶联剂，搅拌，45～60℃反应12～16小时，冷却，透析，得到氨基化锂皂石LM-NH₂；

步骤2)：将TPGS溶解在溶剂中，加入CDI活化5～7小时，然后滴加到步骤1)制得的氨基化锂皂石LM-NH₂的水溶液中反应48～72小时，透析，得到 TPGS修饰的锂皂石纳米颗粒LM-TPGS；

步骤3)：将阿霉素水溶液滴加入到步骤2)制得的TPGS修饰的锂皂石纳米颗粒LM-TPGS的水溶液中，避光反应搅拌12～24小时，离心洗涤，得到 LM-TPGS/DOX。

优选地，所述步骤1)中的硅烷偶联剂为(3-氨基丙基)二甲基乙氧基硅烷(APMES)。