[发明专利]P2X7受体在诊断和治疗类风湿关节炎方面的应用

说明书

本发明属于生物医学技术领域，公开了P2X7受体在诊断和治疗类风湿关节炎诊断方面的应用。本发明首先鉴定发现了P2X7受体在类风湿关节炎病中异常高表达，P2X7受体与类风湿关节炎炎症因子水平呈正比，靶向抑制P2X7受体可抑制类风湿关节炎炎症反应作用，因此可用于类风湿关节炎的诊断和治疗，克服了现有类风湿关节炎诊断标志物特异性不高、灵敏度不够的缺点，对于类风湿关节炎的诊断价值好、检测快速方便、准确率高、特异性强、灵敏度高，可以实现对类风湿关节炎的准确诊断，在医疗行业类风湿关节炎的辅助诊断和治疗方面具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域。更具体地，涉及P2X7受体作为类风湿关节炎的诊断标志物的应用及其在类风湿关节炎炎症反应中的治疗作用。

背景技术

类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis，RA)是一种自身免疫性疾病，其病理特征为炎症反应和炎症细胞因子分泌增多，临床表现为长期慢性炎症浸润、关节疼痛、关节肿大和关节畸形，对人类健康和生活带来极大伤害。流行病学研究发现世界女性类风湿关节炎发病率约为1.16％，男性为0.44％，类风湿关节炎已成为亟待解决的公共卫生问题，也是临床研究的热点。

类风湿关节炎发病机制主要有炎症细胞因子学说、T细胞学说、Th17细胞学说等，但其详细的发病机制尚不清楚。炎症反应是类风湿关节炎最重要的致病机制，研究表明采用敲除IL-1、抗体阻断IL-6或拮抗TNF-α等方法均可阻断类风湿关节炎的炎症反应，一定程度上改善类风湿关节炎疾病状态，但仍有一部分病人没有得到缓解，给社会和家庭带来极大伤害，因此寻找新的靶点来抑制炎症细胞因子分泌和炎症反应对治疗类风湿关节炎至关重要。

P2X7受体是嘌呤受体中的一个亚型，为ATP控制的离子通道，在单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞中高等表达，其被ATP激活后导致K⁺外流和Ca²⁺内流、形成非选择性膜孔，启动一系列信号途径如NF-κB信号通路，同时促进炎症细胞因子转录。研究表明：P2X7受体在真菌感染、支气管哮喘、慢性阻塞性肺病、脊髓损伤、炎症性神经痛、高血压、糖尿病等多种炎症相关疾病中扮演重要角色。然而，P2X7受体在作为类风湿关节炎诊断标志物及其在类风湿关节炎病中的治疗作用尚无文献报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现在类风湿关节炎病诊断标志物特异性不好、灵敏度不高的缺陷和不足，提供一种新的类风湿关节炎的诊断标志物，即P2X7受体。

本发明的目的是提供P2X7受体在作为类风湿关节炎诊断标记物方面的应用。

本发明的另一目的是提供一种检测P2X7受体基因转录水平的荧光定量PCR引物对。

本发明的再一目的是提供一种类风湿关节炎诊断试剂盒。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

本发明利用RT-PCR法检测骨关节置换病人和类风湿关节炎患者P2X7受体表达时意外发现，类风湿关节炎患者P2X7受体水平明显高于骨关节置换手术患者。随后利用ROC曲线对P2X7受体进行分析，结果显示其AUC面积为0.884，诊断价值较好，P2X7受体对类风湿关节炎诊断敏感性和特异性分别为80％和92％，具有特异性好、灵敏度高的特点。另外，本发明人利用ELISA法检测类风湿关节炎患者血清中RF、L-1β、IL-6、IL-8水平，并且进行相关性分析，结果显示P2X7受体水平与类风湿关节炎患者血清中炎症细胞因子IL-1β、IL-6和IL-8呈正相关，利用小分子干扰RNA特异性沉默P2X7受体后抑制了类风湿关节炎的炎症反应。因此，P2X7受体可以作为类风湿关节炎的诊断标记物，以及作为类风湿关节炎的治疗靶点。

基于上述发现成果，以下应用均应在本发明的保护范围之内：

本发明请求保护P2X7受体在作为类风湿关节炎诊断标记物方面的应用。