[发明专利]一种非小细胞肺癌检测试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种非小细胞肺癌检测试剂盒及其应用。本发明公开的非小细胞肺癌检测试剂盒包括检测9个miRNA(miRNA‑hsa‑miR‑20a、hsa‑miR‑25、hsa‑miR‑223、hsa‑miR‑320、hsa‑miR‑222、hsa‑miR‑146a、hsa‑miR‑191、hsa‑miR‑24和hsa‑miR‑130a)、CEA与CYFRA21‑1含量的物质。利用本发明的试剂盒能够很好地筛选非小细胞肺癌，且敏感性高，特异性高，适于筛选非小细胞癌，尤其是早期非小细胞肺癌。因此，可利用这9个miRNA联合CEA与CYFRA21‑1对人群的肺癌风险进行早期预警，提高早诊的比例。

技术领域

本发明涉及生物医学领域中，一种非小细胞肺癌检测试剂盒及其应用。

背景技术

肺癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一。肺癌主要分为小细胞肺癌和非小细胞肺癌。我国主要的肺癌类型为非小细胞肺癌，约占肺癌患者的80％，主要包括腺癌及鳞癌两大类型。及时早期发现肺癌患者，早期治疗，极有可能提高肺癌患者的生存率、降低死亡率。

目前，常用的肺癌的诊断主要依赖于影像学上发现肺内肿物，包括胸部X片、CT、核磁共振(MRI)等影像学方法，同时结合血清中的肿瘤标志物如癌胚抗原等。但影像学检查在肿瘤早期诊断中还具有一定的局限性，例如很难发现体积小的肿瘤；CT等放射线检查方法对患者具有辐射伤害；MRI等精密度高的仪器检查费用高，预约时间长，普及受限。特别是，影像学检查对操作者技术要求高，无经验的人员误诊率高。循环肿瘤生物标志物由于具有无创性，可动态监测等优点，在无症状人群肿瘤筛查方面极具应用前景。目前临床应用的循环肿瘤标志物大多为蛋白、多肽、激素、糖类等，癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)是临床上辅助诊断肺癌的常用肿瘤标志物，对肺癌的辅助诊断具有一定参考价值，但对肺癌的诊断缺乏足够的敏感性和特异性。因此，发现新的肺癌的肿瘤标志物具有重要意义。

MicroRNA(简写为miRNA)是一类在转录后水平调节基因表达的长度约为22个核苷酸的真核生物内源性小分子单链RNA。已有报道证明miRNA的异常表达与肿瘤的发生、发展密切相关，miRNA起到类似癌基因或抑癌基因一样的功能。许多研究表明，游离miRNA的表达异常与多种肿瘤、炎症、感染性疾病有关，显示了其可作为潜在的疾病包括肿瘤的诊断标志物。研究证实循环miRNA在肿瘤发生早期即发生明显的异常表达，可用于肿瘤早期诊断，循环miRNA作为肿瘤诊断标志物，具有非侵入、可动态监测的优点，是对早期肿瘤患病诊断技术的良好补充。

目前已有研究报道循环miRNA可作为非小细胞肺癌的标志物，诊断价值较高。但是，不同研究小组大多采用单一的参考miRNA进行数据归一化，不同的非小细胞肺癌研究筛选的标志物差异较大，某些miRNA的诊断价值在不同的研究报道中变化较大。此外，miRNA与肿瘤蛋白标志物的互补性、对其他组织器官良恶性疾病的特异性等研究鲜有报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何诊断非小细胞肺癌。

为解决上述技术问题，本发明首先提供了检测9个miRNA表达量的系统在制备诊断或辅助诊断非小细胞肺癌产品中的应用；

所述9个miRNA为hsa-miR-20a、hsa-miR-25、hsa-miR-223、hsa-miR-320、hsa-miR-222、hsa-miR-146a、hsa-miR-191、hsa-miR-24和hsa-miR-130a。

上述应用中，所述表达量可为绝对表达量或相对表达量。所述相对表达量可为相对于ath-miR159a、hsa-miR1228和/或hsa-miR-16含量的相对表达量，也可为相对于ath-miR159a、hsa-miR1228和hsa-miR-16平均含量的相对表达量。所述表达量可为所述9个miRNA在血浆和/或血清中的表达量。

上述应用中，所述检测9个miRNA表达量的系统可包括利用定量PCR检测所述9个miRNA的表达量的系统。