[发明专利]一种款冬花液相特征图谱的构建方法

说明书

本发明公开了一种款冬花特征图谱的构建方法，涉及中药特征图谱的构建技术领域。本发明液相特征图谱的构建方法，包括如下步骤：(1)款冬花经50％甲醇提取后过滤膜得测试溶液；(2)经高效液相色谱仪检测得化学特征图谱；(3)经图谱分析确定款冬花液相特征图谱中包含9个特征峰。本发明样本前处理简洁、方便、分析时间较短，重现性好，且能准确反映款冬花药材的某些重要的特征信息，其可用于准确鉴别款冬花的质量。

技术领域

本发明涉及中药特征图谱的构建，特别涉及一种款冬花液相特征图谱的构建方法。

背景技术

款冬花为我国传统中药材，具有润肺下气，止咳化痰的功效，含有苯丙素类、萜类、黄酮类、甾体类、生物碱、挥发油等成分。现行的《中国药典》及部分文献对款冬花质量控制方法较为简单，仅以款冬酮作为药材质量评价的单一指标，而单一指标的测定难以真正准确鉴别药材质量。

特征图谱是选取图谱中某些重要的特征信息，作为控制中药质量的重要鉴别手段。其中，特征图谱改变了以往单一成分或主斑点的鉴别模式，主要用于中药材、饮片、提取物的真伪鉴别与制剂处方多药味的鉴别，以及评价药材的道地性与制剂质量的稳定性。目前2015版《中国药典》中已有羌活、沉香药材和山楂叶、茵陈、连翘提取物建立了特征图谱，而款冬花的特征图谱药典尚未收载，也未见相关文献报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术存在的问题，提供一种能全面反映款冬花药材质量的特征图谱的构建方法。

本发明的目的通过如下技术方案实现：

一种款冬花液相特征图谱的构建方法，包括如下步骤：

1、一种款冬花液相特征图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)对照溶液的制备：取款冬花对照药材粉末1g，加入50％甲醇(体积浓度)20mL，超声提取0.5-1h，以50％甲醇补足损失重量，溶液过0.22μm微孔滤膜即可；

(2)供试品溶液的制备：取款冬花粉末1g，加入50％甲醇20mL，超声提取0.5-1h，以50％甲醇补足损失重量，溶液过0.22μm微孔滤膜即可；

(3)分别吸取对照溶液与测试溶液至高效液相色谱仪测定，得到化学特征图谱；所述液相色谱条件如下：

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；柱温：25℃-35℃；紫外检测波长：0-25min以254nm检测，25-45min以220nm检测；流动相：A相为乙腈，B相为0.3％～0.5％磷酸水溶液，梯度洗脱，每1次进样完成后，系统平衡5min后再次进样；

梯度洗脱条件：0-10min，13％A相；10-25min，13％-40％A相；25-30min，40％-90％A相；30-45min，90％-95％A相；

(4)分析供试品特征图谱中是否呈现与对照药材中的9个主要特征峰保留时间相对应的色谱峰；9个特征峰所对应的化合物分别是：1号峰：绿原酸；2号峰：芦丁；3号峰：金丝桃苷；4号峰：异绿原酸B；5号峰：异绿原酸A；6号峰：异绿原酸C；7号峰：款冬酮；8号峰：1β,8-bisangeloyloxy-3β,4β-epoxybisabola-7(14),10-diene；9号峰：款冬素酯。

所述步骤(1)和(2)中超声提取时间为0.5h。

所述步骤(3)中液相色谱条件中的柱温：25℃，流动相B相为0.4％磷酸水溶液。

所述步骤(4)中所述特征图谱的9个特征峰，以2号峰为参照峰，相对保留时间：1号峰：0.575±0.008；3号峰：1.045±0.000；4号峰：1.087±0.001；5号峰：1.132±0.002；6号峰：1.153±0.003；7号峰：1.716±0.002；8号峰：1.855±0.002；9号峰：2.037±0.007。