[发明专利]一种基于抗体硫化制备金纳米棒免疫探针的方法及应用

权利要求书

1.一种金纳米棒免疫探针的制备方法，其特征在于首先硫化IgG抗体，使其偶联上巯基，巯基与金纳米棒有高度亲和力，可共价结合成为纳米棒免疫探针。

2.根据权利要求1所述的金纳米棒免疫探针的制备方法，其特征在于用DTT试剂硫化IgG抗体使其偶联上巯基。

3.根据权利要求1和2所述的金纳米棒免疫探针的制备方法，其特征在于包括如下步骤：合成金纳米棒，用DTT试剂硫化IgG抗体，硫化后IgG抗体与金纳米棒共价结合为纳米棒免疫探针。

4.根据权利要求3所述的金纳米棒免疫探针的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

1) 制备金纳米种子：在表面活性剂十六烷基三甲基溴化胺CTAB的存在下，通过化学还原剂硼氢化纳NaBH₄将氯金酸溶液中的正三价金还原为金纳米种子；

2）金纳米棒的制备：将步骤1）制备的金纳米种子加入到金纳米棒的生长溶液中制备金纳米棒，离心去除过量的CTAB，将金纳米棒浓缩保存；

3） 抗体修饰：向IgG抗体溶液中加入DTT试剂，室温反应0.5~1.5h后，去除未反应的DTT试剂；

4）金纳米棒的功能化：将步骤3）中去除未反应的DTT试剂的IgG抗体逐滴加入金纳米棒中，形成金纳米棒免疫探针。

5.按照权利要求1的制备方法制备的金纳米棒免疫探针在检测IgG抗原中的应用。

6.一种功能化金纳米棒生物芯片的制备方法，其特征在于将玻片经(3-巯基丙基)三甲氧基硅烷处理使玻片上带有-SH，金纳米棒通过-SH固定于玻片上，将上述固定于玻片上的金纳米棒，浸入经DTT试剂硫化后的IgG抗体中，形成金纳米棒生物芯片。

7.按照权利要求6的制备方法制备的金纳米棒生物芯片在检测IgG抗原中的应用。

8.一种检测IgG抗原的方法，其特征在于将按照权利要求6的制备方法制备的金纳米棒生物芯片加入到待检测介质中，孵育，读取检测后金纳米棒生物芯片的纵向等离子吸收峰的偏移，进行定性定量分析。

9.根据权利要求9所述的检测IgG抗原的方法，其特征在于：所述孵育温度为25℃～37℃，孵育时间为0.5~1h。

10.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于：通过对前面步骤标准化及多次平行实验获得可靠性高的线性范围进行定量分析。