[发明专利]一种三叶青总酚类的提取及纯化方法

说明书

本发明属于酚类提取及纯化方法技术领域，具体为一种三叶青总酚类的提取及纯化方法，包括如下步骤：步骤1、将干燥后的三叶青叶粉碎，得三叶青叶药材粉末，加入乙醇，所述乙醇的加入量为三叶青叶药材粉末重量的10‑35倍，选择回流提取、温浸提取或超声提取的任意一种提取方法，提取液在50‑80℃的条件下抽滤；步骤2、将步骤1的提取液除去乙醇得到提取浓缩液，将提取浓缩液上样于大孔吸附树脂柱上，上样后，先用除杂溶剂进行淋洗，所述除杂溶剂为pH＝3的酸水，再用乙醇溶液进行洗脱，收集含总酚类的洗脱液，洗脱液浓缩至干得纯化的三叶青总酚类。本发明制备方法简单，操作方便，得到了最佳的三叶青总酚类提取及纯化方法。

技术领域

本发明属于酚类提取及纯化方法技术领域，具体为一种三叶青总酚类的提取及纯化方法。

背景技术

三叶青属葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤(Tetrastigma hemsleyanum Diels etGilg)科植物，是我国使用较为悠久的一种药用植物，金线吊葫芦、丝线吊金钟、三叶扁藤、石老鼠等均为三叶青现有别名；其性凉，味苦、辛，无毒。根据中国古代医书记载，三叶青经常用来治疗高热惊厥、肺炎、肝炎、月经不调等疾病。

现代研究表明三叶青有抗肿瘤、抗炎、解热、镇痛、保肝、抗病毒等作用，是我国特有且经常使用的中草药。在民间，三叶青全草入药，由于叶的资源为可持续、再生资源，实验研究发现，三叶青叶酚类成分含量也较高，经液质定性酚类成分包括酚类类和酚酸类化合物是三叶青叶中主要活性成分。并且经研究证实三叶青叶的药理活性包括抗肿瘤、抗氧化、治疗心血管疾病、抗炎、抗病毒、抗感染等。

近些年来有关三叶青研究涉及到了很多方面，但是对于三叶青叶中总酚类的提取及纯化方法研究并没有深入考察，做到最佳。并且目前多数研究对象都是三叶青块根，对于三叶青叶研究较少，对于三叶青叶总酚类的提取、纯化方法研究鲜有报道，并且通常是利用紫外分光光度法对总酚类含量进行测定来优化工艺，不能针对性的保证有效成分的提取率。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供一种三叶青总酚类的提取及纯化方法。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：一种三叶青总酚类的提取及纯化方法，包括如下步骤：

步骤1、将干燥后的三叶青叶粉碎，得三叶青叶药材粉末，加入乙醇，所述乙醇的加入量为三叶青叶药材粉末重量的10-35倍，选择回流提取、温浸提取或超声提取的任意一种提取方法，提取液在50-80℃的条件下抽滤；

步骤2、将步骤1的提取液除去乙醇得到提取浓缩液，用大孔吸附树脂进行湿法装柱，将提取浓缩液上样于大孔吸附树脂柱上，上样后，先用除杂溶剂以2-6BV/h的流速进行淋洗，所述除杂溶剂为pH＝2-6的酸水，用量为1-5BV，再用50％-90％的乙醇溶液以2-6BV/h的流速进行洗脱，收集含总酚类的洗脱液，洗脱液浓缩至干得纯化的三叶青总酚类。

本发明的有益效果在于：本发明提供的三叶青总酚类的提取及纯化方法，采用高效液相色谱法和紫外分光光度法相结合，对三叶青叶提取物中的酚类成分含量进行测定，高效液相色谱法具有高重现性和高灵敏度，使得实验结果更加准确，并综合分析其得膏率，基于单因素考察，结合正交实验法得到最佳的三叶青总酚类提取及纯化方法；所有抽滤时保持在50-80℃的条件下抽滤，在提取方法研究过程中发现，将一定体积的不同体积分数的乙醇加入三叶青叶粉末中时，当乙醇浓度低于50％时，三叶青粉末飘浮于乙醇液面上，不能立即浸润。保持微沸提取一段时间后均沉于底部。当提取完成抽滤获得上清液时，浓度低于50％乙醇很难过滤，并且提取效率不佳。此时乙醇浓度不够，所提取出来的三叶青多糖及粘液质等成分较多，使得提取液较为粘稠，所有抽滤时尽量保持在50-80℃的条件下抽滤，减少滤液体积的损失。采用酸水作为除杂溶剂，三青叶中的总酚类不会跟随酸水洗脱被洗脱，几乎没有泄露，杂质被洗脱下来，提高了三叶青总酚类的纯化效果。

附图说明