[发明专利]一种细胞毒性检测试剂组合有效
申请号: | 201810871985.3 | 申请日: | 2018-08-02 |
公开(公告)号: | CN108956979B | 公开(公告)日: | 2021-07-27 |
发明(设计)人: | 尹锋;金华君;黄晨;郑美美;刘迪;程静波;钱其军 | 申请(专利权)人: | 上海细胞治疗集团有限公司;上海细胞治疗研究院 |
主分类号: | G01N33/539 | 分类号: | G01N33/539;G01N33/58 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 韦东 |
地址: | 201805 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞 毒性 检测 试剂 组合 | ||
1.一种细胞毒性检测试剂盒,包括含铕试剂、BATDA试剂和细胞培养基,其特征在于,所述细胞培养基中含有质量体积百分比为3%-25%的白蛋白。
2.根据权利要求1所述细胞毒性检测试剂盒,其特征在于,所述含铕试剂是pH 3-6的铕溶液。
3.根据权利要求1所述细胞毒性检测试剂盒,其特征在于,所述含铕试剂是PerkinElmer货号为AD0116的产品中的DELFIA铕溶液。
4.根据权利要求1所述细胞毒性检测试剂盒,其特征在于,所述BATDA试剂是BATDA溶液,所述BATDA溶液的溶剂为DMSO。
5.根据权利要求1所述细胞毒性检测试剂盒,其特征在于,所述BATDA试剂是PerkinElmer货号为AD0116的产品中的DELFIA BATDA试剂。
6.根据权利要求1所述细胞毒性检测试剂盒,其特征在于,所述白蛋白为选自人血白蛋白、牛血白蛋白和羊血白蛋白中的一种或多种。
7.根据权利要求1所述细胞毒性检测试剂盒,其特征在于,所述白蛋白是人血白蛋白或牛血白蛋白。
8.根据权利要求1-7中任一项所述细胞毒性检测试剂盒,其特征在于,其还包括细胞裂解液。
9.根据权利要求8所述细胞毒性检测试剂盒,其特征在于,所述细胞裂解液包含质量体积百分比为0.02%-0.05%的洋地黄皂苷和体积百分比为10%-19%的DMSO,余下为水。
10.一种检测细胞毒性的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将待检测细胞接触BATDA、洗涤,然后悬于含有质量体积百分比为3%-25%的白蛋白的体系;
2)用细胞毒性试剂处理1)中悬于含有质量体积百分比为3%-25%的白蛋白的体系的待检测细胞,得细胞毒性试剂处理后的产物;
3)将2)中所述细胞毒性试剂处理后的产物接触铕溶液,检测荧光值。
11.根据权利要求10所述方法,其特征在于,1)中所述待检测细胞为肿瘤细胞。
12.根据权利要求11所述方法,其特征在于,所述肿瘤细胞为淋巴瘤细胞、卵巢癌细胞、肝癌细胞或胃癌细胞。
13.根据权利要求12所述方法,其特征在于,所述淋巴瘤细胞为Raji细胞。
14.根据权利要求10所述方法,其特征在于,1)中所述含有质量体积百分比为3%-25%的白蛋白的体系为细胞培养基。
15.根据权利要求14所述方法,其特征在于,所述细胞培养基为含有质量体积百分比为3%-25%的白蛋白和体积百分比为10%的胎牛血清的RPMI培养基。
16.根据权利要求10所述方法,其特征在于,1)中所述接触的温度为37℃。
17.根据权利要求10所述方法,其特征在于,1)中所述接触的时间为30分钟。
18.根据权利要求10所述方法,其特征在于,2)中所述细胞毒性试剂为选自细胞毒性的小分子化合物、生物大分子和效应细胞中的一种或多种。
19.根据权利要求10所述方法,其特征在于,2)中所述细胞毒性试剂为细胞毒性的免疫效应细胞。
20.根据权利要求19所述方法,其特征在于,所述细胞毒性的免疫效应细胞选自CAR-T细胞、CAR-NK细胞和TCR-T细胞中的一种或多种。
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