[发明专利]一种显微观察黄蚜小蜂的制片方法在审
| 申请号： | 201810874528.X | 申请日： | 2018-08-03 |
| 公开（公告）号： | CN109141997A | 公开（公告）日： | 2019-01-04 |
| 发明（设计）人： | 王竹红;黄建;司宇;张慧 | 申请（专利权）人： | 福建农林大学 |
| 主分类号： | G01N1/28 | 分类号： | G01N1/28 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350002 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 蚜小蜂 制片 显微观察 组织裂解液 玻片标本 微观结构 永久保存 丁香油 烘干 扇状 树胶 胸腹 酒精 拍照 解剖 保证 标本 清晰 观察 制作 | ||
1.一种显微观察黄蚜小蜂的制片方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：
（1）100%酒精浸泡、清洗新鲜黄蚜小蜂标本；
（2）将黄蚜小蜂标本放入1.5ml离心管中，加入90ul 组织裂解液和10 ul蛋白酶K，放入56℃的水浴中，过夜；
（3）将过夜后的溶液吸掉，保留黄蚜小蜂标本，后加入200ul 100%酒精；
（4）取一凹形载玻片，将黄蚜小蜂标本连同酒精吸到载玻片凹处，待酒精挥发干净同时加入10ul纯净水，标本背部朝上；
（5）待黄蚜小蜂标本背部表层纯净水挥发干净时，将标本放置于显微镜下显微拍摄扇状突结构；
（6）拍摄结束后，吸掉多余纯净水，滴20ul丁香油淹没黄蚜小蜂标本；
（7）取一普通载玻片，将黄蚜小蜂标本连同丁香油一同移到普通载玻片上，解剖，小心取下头部、触角和翅膀，剩下虫体整姿；
（8）用滤纸吸掉多余丁香油，加一薄层加拿大树胶，使头部、触角、翅膀和虫体固定；
（9）使用40℃烘片机烘24小时；
（10）取上述烘干的标本，逐层加加拿大树胶2-3次，最后使头部、触角、翅膀和虫体分别埋没在加拿大树胶中；
（11）在加拿大树胶未完全凝固前，取圆形盖玻片封片；
（12）使用烘片机40℃烘2周直至烘干，以有效去除胶中的气泡；
（13）将烘干后的标本置于显微镜下观察、拍摄。
2.根据权利要求1所述的一种显微观察黄蚜小蜂的制片方法，其特征在于：所述组织裂解液为10 mM Tris-HCl，100mM EDTA，1wt.% SDS，pH 8.0。
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