[发明专利]一种抑制MD2与CIRP蛋白结合的短肽及其应用

说明书

本发明公开了一种抑制MD2与CIRP蛋白结合的短肽及其应用，属于生物医药技术领域。本发明公开的短肽是一种基于穿膜肽TAT序列和CIRP蛋白与MD2蛋白结合序列的融合肽。其核苷酸序列如SEQ.ID.NO.3所示。本发明通过实验验证了合成的融合肽能够调控MD2的功能。因此，公开了其同时抑制炎症反应、凋亡、坏死性凋亡，促进损伤修复的治疗新靶点的应用。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及抑制MD2与CIRP蛋白结合的短肽及其应用。

背景技术

目前，脑卒中患者的预后不容乐观。一旦发生脑卒中，1个月死亡率为25％，6个月死亡率为33.3％，1年的死亡率上升至50％。而出血性卒中的预后情况更加严峻，其1个月死亡率就高达50％。由于缺血性和出血性卒中的治疗措施截然不同，因此，临床上区分卒中的类型显得至关重要。然而，区分卒中类型，需要依赖于CT以及MRI(磁共振成像)结果，这些影像学检查结果往往需要几十分钟，甚至数小时，这可能导致错过救治病人的黄金治疗时间。对于缺血性卒中，目前美国FDA唯一批准的药物只有tPA(组织型纤溶酶原激活物)。然而，由于其治疗时间窗短(缺血发生后4.5小时以内)及增加出血倾向，目前只有4％到7％的病人能够接受tPA的治疗。对于出血性卒中，除了外科减压、清除血肿、引流手术以及对症支持治疗外，没有任何药物能够有效地减轻其造成的神经损伤。因此，如何治疗卒中依然是一个亟待解决的难题。

在动物实验中，大量的药物及干预措施被证实能够显著减轻卒中造成的神经损伤。然而，已完成的几百项临床试验均以失败告终。结合临床及动物研究深入分析发现，临床试验失败并不仅仅由于药物无效，更多的是在临床试验中，我们的给药时间延迟。造成给药延迟的主要因素就是我们的干预高度依赖于CT及MRI等影像学检查。因此，开发能够同时治疗缺血及出血性脑卒中的药物，成为未来治疗卒中的重要研究方向。

神经损伤涉及多种病理过程，包括兴奋毒性损伤及神经免疫损伤，而这两种病理过程又可以相互促进，形成恶性循环。最终导致细胞坏死，凋亡以及坏死性凋亡的发生。由于坏死是非程序性死亡，不可调控；因此，在过去几十年的研究中，研究者聚焦于凋亡的研究。然而，近年来，研究者发现，如果我们单纯抑制凋亡，细胞会向另一种可调控的细胞死亡方式——坏死性凋亡转化。这种转化非但不能减轻损伤，反而加重损伤程度。这在很大程度上解释了大量抑制凋亡信号的药物在临床上并不能发挥保护作用。因此，深入了解不同病理过程及不同死亡方式的共同信号通路，才能开发出有效的治疗药物。大量研究表明，免疫炎症反应在卒中发生后的急性损伤，后期修复等多个阶段都发挥着重要作用。Toll样受体4-髓样分化蛋白(2TLR4-MD2)复合物介导的信号通路是免疫炎症反应中的重要组成部分，同时参与了缺血及出血性卒中的病理过程。更重要的是，TLR4-MD2介导的信号通路是炎症、凋亡及坏死性凋亡等多种病理过程的共同信号通路。但是，目前有关MD2的报道，主要集中在参与外周组织器官的免疫炎症反应。但MD2是否介导中枢神经系统损伤、脑卒中的损伤及以MD2为干预靶点的治疗措施尚未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抑制MD2与CIRP蛋白结合的短肽及其应用。

本发明是通过以下技术方案来实现：

本发明公开了一种抑制MD2与CIRP蛋白结合的短肽，该短肽是由穿膜肽TAT和CIRP蛋白与MD2结合的功能区域序列融合而成的线性短肽TAT-CIRP，其中，穿膜肽TAT的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，CIRP蛋白与MD2结合的功能区域的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2所示，线性短肽TAT-CIRP的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.3所示。

本发明还公开了上述抑制MD2与CIRP蛋白结合的短肽在制备治疗脑卒中药物中的应用。

优选地，所述的药物为抑制MD2功能发挥的药物。

进一步优选地，所述的药物为通过特异性结合MD2抑制MD2介导的细胞死亡的药物。